Para implementar una respuesta inmune correcta, es necesario distinguir "propio" de "ajeno". Esta propiedad está asociada a un sistema de genes que determinan la síntesis de moléculas propias de cada organismo. Estas moléculas fueron descubiertas a fines de la década de 1950 por el investigador francés Jean Dosset debido a su capacidad para inducir el rechazo del trasplante durante el trasplante de tejido dentro de la misma especie animal. Por lo tanto, se denominaron antígenos de histocompatibilidad o antígenos de trasplante. Dado que en humanos dichas moléculas se identificaron por primera vez en los leucocitos sanguíneos, el sistema de antígenos de histocompatibilidad humana se denominó antígenos leucocitarios humanos (Human Leukocyte Antigens), abreviado como HLA. El sitio correspondiente en el sexto cromosoma, donde se encuentran los genes que codifican los antígenos de histocompatibilidad, se denomina complejo HLA. En todos los mamíferos, el complejo principal de histocompatibilidad se denomina MHC (Complejo Mayor de Histocompatibilidad).

Hay tres clases de genes del complejo mayor de histocompatibilidad (Fig. 25). Los antígenos HLA de las clases I y II difieren en estructura, pero luego tienen un destino diferente.

HLA clase I

La clase I incluye los loci A, B, C, E, O, F. Los loci A, B y C se denominan "clásicos" porque codifican antígenos de histocompatibilidad bien estudiados. Los antígenos clásicos de clase I se encuentran en la superficie de todas las células del cuerpo, excepto en los filamentos del trofoblasto. Son ellos quienes dan testimonio de la afiliación organísmica de las células. Para los genes de clase I, es inherente un gran polimorfismo. Entonces, el locus A contiene 40 alelos, B - 60 alelos y C - alrededor de 20. Esto está relacionado con la singularidad sin precedentes del conjunto HLA en cada persona.

El papel de los antígenos de clase I, que están codificados por los loci E, G y F, no ha sido completamente estudiado. Se sabe que en las células trofoblásticas están presentes moléculas codificadas únicamente por el locus G. Esto se considera uno de los mecanismos para mantener la inmunotolerancia del organismo materno a los antígenos del complejo fetoplacentario.

Estructura

Las moléculas de 1ª clase consisten en un pel pesado, que contiene 3 dominios, y uno ligero, formado por un solo dominio. En este caso, solo la cadena pesada tiene una región citoplásmica y forma un surco de unión al péptido.

Síntesis

Las moléculas HLA de clase I se sintetizan en el retículo endoplásmico granular.

HLA 1 ingresa al proteosoma, donde los péptidos formados por la actividad de LMP se cargan en su ranura de unión de péptidos mediante moléculas transportadoras (TAP). Posteriormente, el complejo HLA-péptido ingresa al aparato de Golgi a través de comunicaciones intracelulares y se desplaza en las vesículas que se desprenden de este orgánulo hacia la membrana plasmática externa. El contenido de la vesícula se libera al exterior (exocitosis) y el fragmento de membrana, en el que se incrustan los HLA I recién formados, forma parte del citolema. Cabe señalar que los péptidos para las moléculas de histocompatibilidad de clase I siempre están disponibles, ya que se forman a partir de autoantígenos, algunos de los cuales son escindidos por LMP incluso antes de que comiencen a realizar sus tareas funcionales en la célula.

HLA Clase II

La clase II contiene los loci "clásicos" DR, DQ, DP, que codifican la síntesis de moléculas correspondientes por nombre. Por lo general, los antígenos de clase II se encuentran solo en las membranas de las células presentadoras de antígenos profesionales, que incluyen células dendríticas, macrófagos y linfocitos B. Pero bajo la influencia de la interleucina-2 y el interferón γ, pueden aparecer adicionalmente en otras células (en particular, en los linfocitos T y las células del endotelio vascular). Los antígenos de clase II también son bastante polimórficos, especialmente los codificados por el locus DR. Además de los loci "clásicos" enumerados, los genes de clase II incluyen otros 3: LMP (proteasa multifuncional grande, proteasa multifuncional grande), TAP (transportador para la presentación de antígenos, un transportador para la presentación de antígenos; y el locus DM. Los loci LMP codifican proteasas que llevan a cabo el "corte" de la macromolécula del antígeno y, por lo tanto, determinan el tamaño de los péptidos inmunogénicos formados. El locus TAP proporciona la síntesis de proteínas de transporte que entregan y "cargan" dichos péptidos inmunogénicos en el surco de unión de péptidos de la molécula HLA ( en el llamado bolsillo de Berkman). Curiosamente, ambos genes sirven para la síntesis de moléculas HLA de clase 1. El locus DM codifica la síntesis de proteínas que catalizan el reemplazo del "péptido temporal" con un péptido específico cargado en el péptido de unión. surco de HLA clase II en el caso de que la célula presentadora de antígeno capture el antígeno.

Estructura

Los HLA de clase II forman dos cadenas del mismo peso molecular, cada una de las cuales tiene contacto con el citoplasma y participa en la formación de un surco común de unión a péptidos.

Síntesis

Las moléculas HLA de clase II se sintetizan en el retículo endoplásmico granular.

Las moléculas HLA II se sintetizan en complejo con la llamada cadena invariante, que forma un "péptido temporal" (sin péptido, cualquier molécula de histocompatibilidad no es viable). Posteriormente, el complejo formado ingresa a los lisosomas, donde es destruido por enzimas hidrolíticas, y los monómeros formados se utilizan para la resíntesis de HLA II. Esto sucede hasta que la célula presentadora de antígeno (APC) captura el antígeno. En este caso, se forma un fagolisosoma y es aquí donde entra el complejo HLA II, un péptido temporal. Bajo la influencia de las proteínas DM activadas, el péptido transitorio deja una molécula de histocompatibilidad y en su lugar se carga un péptido inmunogénico formado por el procesamiento del antígeno capturado. Posteriormente, los fragmentos del antígeno destruido se eliminan de la célula por exocitosis. Al mismo tiempo, la membrana de la vacuola exocítica, en la que están incrustados los complejos HLA II-péptido inmunogénico, se fusiona con el citolema y estos complejos aparecen en la superficie celular. En este estado, la APC está lista para la presentación del antígeno. material del sitio

La destrucción y resíntesis continuas descritas de moléculas HLA de clase II se producen en las células dendríticas. Aunque estos últimos gastan energía en el aparentemente inútil reciclaje de HLA, en cualquier momento están completamente preparados para la presentación de antígenos. Dado esto, las células dendríticas se pueden comparar con un automóvil con el motor encendido: solo necesita presionar el acelerador y se moverá de inmediato. Los macrófagos, a diferencia de las células dendríticas, inician la síntesis de HLA II sólo después de la fagocitosis del objeto, por lo que participan más lentamente en el proceso de presentación del antígeno. El macrófago utiliza la energía ahorrada para la síntesis de una serie de proteínas necesarias para realizar funciones efectoras. Recuerde que los macrófagos combinan las funciones de una célula presentadora de antígeno, un fagocito y una célula efectora en las reacciones de citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos.

GOU VPO Academia Estatal de Medicina de Tver del Ministerio de Salud de Rusia Departamento de Inmunología Clínica con Alergología

COMPLEJO PRINCIPAL DE COMPATIBILIDAD HISTO

Material didáctico de inmunología general. Tver 2008.

productos

Desarrollo educativo y metodológico para clases prácticas de inmunología general para estudiantes de 5to año de las facultades de medicina y pediatría, así como para residentes clínicos y médicos interesados ​​en inmunología.

Compilado por el Profesor Asociado Yu.I. Budchanov.

Jefe de Departamento, Profesor A.A. Mikhailenko

© Budchanov Yu.I. 2008

La inmunogenética de la motivación es una nueva e importante rama de la inmunología. Conocimiento del sistema de histocompatibilidad.

es necesario no solo en transplantología, sino también en la comprensión de la regulación de la respuesta inmune y la interacción de las células en la respuesta inmune. La determinación de antígenos HLA se utiliza en medicina forense, estudios de genética de poblaciones y en el estudio del gen de predisposición a enfermedades.

1. El alumno debe conocer: A. La estructura del sistema HLA humano.

B. Antígenos HLA de clases I, II y su papel en las interacciones intercelulares. B. Los conceptos de genotipo, fenotipo, haplotipo.

D. Importancia de la tipificación HLA en medicina.

E. Relación entre los antígenos HLA y varias enfermedades humanas. 2. El estudiante debe ser capaz de:

Aplicar los conocimientos adquiridos de inmunogenética en la práctica clínica.

Preguntas para la autopreparación sobre el tema de la lección:

1. El concepto de genes y antígenos de histocompatibilidad. Sistema humano HLA. Nomenclatura, organización de genes (genes de clases I, II, III).

2. Antígenos de clases I y III, su papel en las interacciones intercelulares, en la presentación de antígenos Los linfocitos T, en el fenómeno del doble reconocimiento.

3. El concepto de fenotipo, genotipo, haplotipo HLA. Características de la herencia.

4. Métodos de investigación y tipificación del sistema HLA: serológicos, celulares, génicos (reacción en cadena de la polimerasa, sondas de ADN).

5. Aspectos prácticos de la tipificación de antígenos HLA. HLA en poblaciones, significado biológico.

6. HLA y enfermedades humanas, mecanismos de asociación.

LITERATURA PARA LA AUTOEDUCACIÓN

1. Khaitov R.M., Ignatieva G.A., Sidorovich I.G. Inmunología. Norma y patología. Libro de texto. - 3ro

ed., M., Medicina, 2010. - 752 p. – [pág. 241 - 263].

2. Khaitov R. M. Inmunología: un libro de texto para estudiantes de medicina. – M.: GEOTAR-Media, 2006. - 320p. - [Con. 95-102].

3. Belozerov ES Inmunología clínica y alergología. A-Ata., 1992, pág. 31-34.

4. Zaretskaya Yu.M. Inmunogenética clínica. M, 1983.

5. Desarrollo metódico. 6. Conferencia.

literatura adicional

Konenkov VI Inmunogenética médica y ecológica. Novosibirsk, 1999 Yarilin A.A. Fundamentos de inmunología. M., 1999, pág. 213-226.

Alekseev L.P., Khaitov R.M. HLA y medicina. Se sentó. Problemas modernos de alergología, inmunología e inmunofarmacología. M., 2001, pág. 240-260.

¿PUEDES RESPONDER?

(Ingrese en casa. El autocontrol identificará preguntas difíciles para la discusión. En clase, verificará la corrección de las respuestas, las complementará. Trate de encontrar respuestas por su cuenta y demuestre que puede hacerlo).

1. ¿En qué par de cromosomas se localiza el complejo mayor de histocompatibilidad en los humanos? …………….

2. ¿Las células de qué órganos y tejidos contienen células de trasplante? …………antígenos

……………………………………………………………………………….……………………. .

3. ¿Qué significa la abreviatura HLA? ……………………………………………………………………………….

………………………………………………………………………………………… .

4. ¿En qué células no se encuentran los antígenos del sistema HLA? …………………….…

…………………………………………………………………………………………. .

5. De qué loci, subloci consiste el MCGS: Clase I ……..………… Clase II ………………………………

Grado III …………………………………….. .

6. ¿Los productos génicos de qué clase de MHC no se expresan en la membrana celular? ………………………….

7. ¿Qué células deben aislarse para detectar HLA clase II? ………………..…………………… .

8. ¿Cómo se detectan los antígenos HLA? ……………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………….. .

9. El paciente tipificado tiene 6 antígenos posibles HLA-A, HLA-B, HLA-C. ¿Cuál es el nombre de tal situación? ………………………….

10. ¿Qué antígeno de histocompatibilidad se encuentra a menudo en pacientes con espondilitis anquilosante?

…………………….. .

11. ¿Qué genes están incluidos en HLA clase III? ……………………………..………………………………

…………………………………………………………………………………………… .

12. ¿Qué cadenas componen los antígenos HLA de clase I? ………………….

13. ¿De qué cadenas están compuestos los antígenos HLA clase II? ………………

14. ¿El linfocito citotóxico (CD8) reconoce un péptido extraño en el complejo con HLA de qué clase?

…………………………. .

15. Th (CD4+) reconoce un antígeno extraño presentado por una célula dendrítica o un macrófago en combinación con HLA de qué clase? …..………

¿Cuáles son las posibles combinaciones de antígenos eritrocíticos en un niño si la composición isoantigénica

eritrocitos
Padre: AO, NM, ss, dd, Cc, Ee,		y madres: AB, MM, SS, DD, Cc, EE.
Elige la respuesta correcta.
	AO, MN, Ss, DD, CC, EE
	AA, MM, Ss, Dd, cc, ee
	OO, NN, Ss, Dd, CC, Ee
	AB, MN, Ss, Dd, cc, EE
	AO, NN, Ss, Dd, CC, EE
	AB, MM, SS, Dd, cc, Ee
Escribe otra respuesta correcta ___, ___, ___, ___, ___, ___.			¿Puedes hacer más?
¿Cómo? …………. .

Materiales de referencia y teóricos

El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC) es un sistema de genes que controlan la síntesis de antígenos que determinan la histocompatibilidad de los tejidos durante los trasplantes de órganos e inducen reacciones que provocan el rechazo del trasplante. Estructuras superficiales de la citomembrana de las células que inducen reacciones.

rechazo, tengo el nombre antígenos de histocompatibilidad, y los genes que los codifican se denominaron genes de histocompatibilidad: genes H (histocompatibilidad). El descubrimiento de los antígenos de histocompatibilidad sirvió de base para el desarrollo de la inmunología del trasplante.

Posteriormente, se comprobó que el complejo mayor de histocompatibilidad es

el principal sistema genético que determina el funcionamiento del sistema inmunológico,

especialmente el sistema T del sistema inmunológico. GCGC regula la respuesta inmune,et codifica la habilidad reconocer "lo propio" y lo "extranjero", rechazar células extrañas, la capacidad de sintetizar una serie de

Los antígenos clásicos del sistema HLA no se detectan en absoluto en el tejido adiposo y en los eritrocitos, así como en las neuronas y las células trofoblásticas.

		ESQUEMA DE LOCALIZACIÓN DE LOS GENES DEL SISTEMA HLA
		SOBRE EL CROMOSOMA 6
DP LMP TOMA DQ DR		C2 Bf C4b C4a TNF

En los seres humanos, el principal sistema de histocompatibilidad se denomina sistema HLA (Human Leukocyte Antigens). Este es un sistema de genes que controlan la síntesis de antígenos de histocompatibilidad. Consta de tres regiones ubicadas en el brazo corto del sexto cromosoma. Estas regiones se denominan: clase 1, clase 2, clase 3 (clase I, clase II, clase III) La región incluye genes o loci. El nombre de cada gen HLA contiene la designación de letras del locus (A, B, C) y un número de serie, por ejemplo: HLA-A3, HLA-B27, HLA-C2, etc. Los antígenos codificados por el gen también tienen la misma designación.. En el locus D se identificaron 3 sublocus (DP, DQ, DR). (Ver diagrama arriba). Hay 138 antígenos HLA en la lista aprobada por la OMS. (Sin embargo, el uso de la tipificación del ADN, es decir, la capacidad de estudiar los propios genes, ha llevado a la identificación de más de 2000 alelos en los últimos años).

La clase I incluye los loci HLA -A, -B y -C. Estos tres loci del complejo mayor de histocompatibilidad humano controlan la síntesis de antígenos de trasplante, que pueden determinarse por métodos serológicos (CD - Serological Determined). Las moléculas de los antígenos HLA de clase I constan de 2 subunidades: cadenas α y β (ver figura). La cadena pesada o α consta de 3 fragmentos extracelulares: los dominios α1, α2 y α3 (dominios extracelulares), una pequeña región que pertenece a la membrana celular (región transmembrana) y un fragmento intracelular (región citoplásmica). La cadena ligera es β2-microglobulina, unida de forma no covalente a la cadena α y no unida a la membrana celular.

Los dominios α1 y α2 forman un receso en el que se puede ubicar un péptido (región de antígeno) de 8 a 10 aminoácidos de largo. Esta depresión se llama hendidura de unión de péptidos(del inglés hendidura).

(Los nuevos antígenos HLA clase I descubiertos recientemente incluyen antígenos MIC y HLA-G. Actualmente se sabe poco sobre ellos. Cabe señalar que HLA-G, que se denomina no clásico, solo se ha identificado

en la superficie de las células trofoblásticas y proporciona a la madre tolerancia inmunológica a los antígenos fetales).

La región de clase 2 (región D) del sistema HLA consta de 3 subloci: DR, DQ, DP, que codifican antígenos de trasplante. Estos antígenos pertenecen a la categoría de antígenos detectados por métodos mediados por células, es decir, la reacción de un cultivo de linfocitos mixtos (English mixed Lymphocyte Culture - MLC). Más recientemente, se han aislado los loci HLA-DM y -DN, así como los genes TAP y LMP (no expresados ​​en células). Los clásicos son DP, DQ, DR.

El péptido presentado se muestra en rojo.

Recientemente se han obtenido anticuerpos que pueden identificar los antígenos DR y DQ. Por lo tanto, los antígenos de clase 2 actualmente se determinan no solo por métodos mediados por células, sino también serológicamente, así como los antígenos HLA de clase 1.

Las moléculas HLA de clase 2 son glicoproteínas heterodiméricas que consisten en dos cadenas α y β diferentes (ver figura). Cada cadena contiene 2 dominios extracelulares α1 y β1 en el extremo N-terminal, α2 y β2 (más cerca de la membrana celular). También hay regiones transmembrana y citoplasmática. Los dominios α1 y β1 forman un receso que puede unirse a péptidos de hasta 30 residuos de aminoácidos de largo.

Las proteínas MHC-II no se expresan en todas las células. Las moléculas HLA de clase II están presentes en grandes cantidades en las células dendríticas, macrófagos y linfocitos B, es decir, en aquellas células que interactúan con los linfocitos T auxiliares durante la respuesta inmune, usando

Moléculas HLA clase II

linfocitos T

cantidad importante

antígenos de la segunda clase, pero cuando se estimulan con mitógenos, IL-2

comienzan a expresar moléculas HLA clase 2.

Necesario

Marca,

los 3 tipos de interferones

mejorar enormemente

expresión

Moléculas HLA del 1er.

en la membrana celular de varias células. Asi que

interferón γ en

aumenta significativamente la expresión de moléculas de clase 1 en los linfocitos T y B, pero también en las células tumorales malignas (neuroblastoma y melanoma).

A veces se encuentra un trastorno congénito en la expresión de moléculas HLA de 1ª o 2ª clase, lo que conduce al desarrollo de " síndrome de linfocito desnudo en". Los pacientes con tales trastornos sufren de inmunidad insuficiente y, a menudo, mueren en la infancia.

La región de clase III contiene genes cuyos productos están directamente involucrados en la respuesta inmune. Incluye genes estructurales para los componentes del complemento C2 y C4, Bf (factor de owndina) y genes del factor de necrosis tumoral-TNF (TNF). Esto incluye genes que codifican la síntesis de 21 hidroxilasa. Por lo tanto, los productos del gen HLA de clase 3 no se expresan en la membrana celular, sino que se encuentran en un estado libre.

La composición antigénica HLA de los tejidos humanos está determinada por genes alélicos relacionados con cada uno de los loci, es decir, un cromosoma solo puede tener un gen de cada locus.

De acuerdo con los patrones genéticos básicos, cada individuo es portador no más de dos alelos de cada locuso y subloci (uno en cada uno de los cromosomas autosómicos emparejados). El haplotipo (un conjunto de alelos en un cromosoma) contiene un alelo de cada uno de los subloci HLA. Al mismo tiempo, si un individuo es heterocigoto para todos los alelos del complejo HLA, no se detectan más de doce antígenos HLA durante la tipificación (A, B, C, DR, DQ, DP - subloci). Si un individuo es homocigoto para algunos antígenos, se detecta en él un número menor de antígenos, pero este número no puede ser inferior a 6.

Si el sujeto tipificado tiene el número máximo posible de antígenos HLA, esto se denomina "casa llena" ("casa llena" de antígenos).

La herencia de los genes HLA se produce según el tipo codominante, en el que la descendencia en

Los más ricos en antígenos HLA son los linfocitos. Por tanto, la detección de estos antígenos se realiza sobre linfocitos. ( Recuerde cómo aislar linfocitos de sangre periférica).

Las moléculas de los antígenos HLA-A, -B, -C constituyen aproximadamente el 1% de las proteínas en la superficie de los linfocitos, lo que equivale aproximadamente a 7 mil moléculas.

Uno de los avances más significativos en inmunología ha sido el descubrimiento del papel central que juega el MHC en mamíferos y humanos en la regulación de la respuesta inmune. En experimentos estrictamente controlados, se demostró que un mismo antígeno provoca una respuesta inmune de diferente altura en organismos con diferentes genotipos, y viceversa, un mismo organismo puede ser reactivo en diversos grados con respecto a diferentes antígenos. Los genes que controlan esta respuesta inmunitaria altamente específica se denominan genes Ir (genes de respuesta inmunitaria). Están localizados en la región de clase 2 del sistema HLA humano. El control del gen Ir se realiza a través del sistema -T de linfocitos.

Central			celular		interacciones			inmune		te niegas
Interacción			moléculas HLA,			expresado					superficies
células presentadoras de antígenos			representando			para el reconocimiento		extraterrestre			antigénico
péptido y receptor de reconocimiento de antígeno - TCR (receptor de células T)							en la superficie del linfocito T
ayudante. A		simultaneamente			reconocimiento		extraterrestre				pasando

reconocimiento de los propios antígenos HLA.

El ayudante de linfocitos T (CD4+) reconoce un antígeno extraño solo en el complejo con moléculas de superficie de células presentadoras de antígeno MHC de clase 2.

Linfocitos citotóxicos (T-efectores, CD8+) reconocer un antígeno

por ejemplo, de naturaleza viral, en combinación con una molécula HLA de clase I de la célula diana. Los antígenos exógenos están representados por moléculas HLA de clase II,

endógeno - moléculas de clase I.

(Por lo tanto, el proceso de reconocimiento externo está limitado por los antígenos HLA propios. Este es el concepto de "doble reconocimiento" o "autorreconocimiento alterado").

Un papel importante del sistema HLA es también que controla la síntesis de los factores del complemento implicados en las vías clásica (C2 y C4) y alternativa (Bf) de activación del complemento. La deficiencia determinada genéticamente de estos componentes del complemento puede predisponer a enfermedades infecciosas y autoinmunes.

Valor práctico de la tipificación HLA. El alto polimorfismo hace del sistema HLA un excelente marcador en los estudios de genética de poblaciones y el estudio de la predisposición genética a las enfermedades, pero al mismo tiempo crea problemas en la selección de pares donante-receptor en el trasplante de órganos y tejidos.

Los estudios de población realizados en muchos países del mundo han revelado diferencias características en la distribución de antígenos HLA en diferentes poblaciones. Características de la distribución de HLA-

Los antígenos se utilizan en la investigación genética para estudiar la estructura, el origen y la evolución de diferentes poblaciones. Por ejemplo, la población georgiana, perteneciente a los caucasoides del sur, tiene características similares del perfil genético HLA con las poblaciones griega, búlgara y española, lo que indica un origen común.

La tipificación de antígenos HLA se usa ampliamente en la práctica forense para excluir o establecer la paternidad o el parentesco.

Preste atención a la conexión de algunas enfermedades con la presencia de uno u otro antígeno HLA en el genotipo. Esto se debe a que HLA se usa ampliamente para estudiar la base genética. predisposición a la enfermedad. Si antes no se suponía, por ejemplo, que la enfermedad de la esclerosis múltiple tiene una base hereditaria, ahora, gracias al estudio de la conexión con el sistema HLA, se establece firmemente el hecho de una predisposición hereditaria. Usando

	el sistema HLA, para algunas enfermedades, también se determina el modo de herencia.
Por ejemplo,	anquilosante		espondilitis		dominante autosómico			herencia,
hemocromatosis e hiperplasia suprarrenal congénita - autosómica recesiva. Muchas gracias
	asociaciones	anquilosante		espondilitis		Antígeno HLA-B27, tipificación HLA

utilizado en el diagnóstico de casos tempranos y poco claros de esta enfermedad. Se han identificado marcadores genéticos de diabetes mellitus insulinodependiente.

TRABAJO PRACTICO

Determinación de antígenos HLA "en donantes"

La tipificación de antígenos tisulares se realiza utilizando un conjunto de sueros, que consta de 50 o más sueros antileucocitarios (sueros de mujeres multíparas, que dan del 10 al 80% de reacciones positivas con leucocitos fetales, o suero de voluntarios inmunizados

humano	leucocitos que contienen				ciertos antígenos SD.				Sueros
mujeres multíparas, como resultado de la inmunización natural con los antígenos HLA del marido durante
embarazo, contienen en algunos casos anticuerpos contra HLA en un título suficientemente alto).
Serológicamente		antígenos			histocompatibilidad				definir
linfocitotóxico		prueba (inglés)		prueba de linfocitotoxicidad).						llamó
micro linfocitotóxico				usar			puesta en escena			microvolumen
ingredientes.

Su principio se basa en la interacción de las moléculas HLA en la superficie de los linfocitos de la persona examinada con anticuerpos anti-HLA específicos y complemento, lo que conduce a la muerte celular. La muerte celular se determina mediante microscopía de luz convencional después de teñir con tintes vitales.

Se mezclan suspensiones de linfocitos con antisuero a un antígeno específico (HLA-B8, HLA-B27, etc.), se incuban 1 hora a 25 C, se agrega complemento y se incuba nuevamente por 2 horas a 37 C, y luego azul tripano o se agrega eosina. Si en los linfocitos está presente un antígeno correspondiente a los anticuerpos contenidos en el suero, los anticuerpos en presencia del complemento dañan la membrana leucocitaria, el colorante penetra en su citoplasma y se tiñen de azul o rojo (si se utilizó eosina).

¿Qué células se teñirán con la tipificación HLA?

A partir de los resultados de la tipificación se establece el grado de compatibilidad del donante y el receptor y la posibilidad de trasplante de un órgano o tejido entre ambos. El donante y el receptor deben ser compatibles en cuanto a antígenos eritrocíticos ABO y Rh, antígenos leucocitarios del sistema HLA. Sin embargo, en la práctica es difícil encontrar donante y receptor completamente compatibles. La selección se reduce a la selección del dono más adecuado. El trasplante es posible con

incompatibilidad para uno de los antígenos HLA, pero en el contexto de una inmunosupresión significativa. La selección de la proporción óptima de antígenos de histocompatibilidad entre el donante y el receptor prolonga significativamente la vida del injerto.

La lección demostrará las placas HLA para la tipificación de leucocitos. Recuerde cómo obtener una suspensión pura de linfocitos a partir de células de sangre periférica. Piense en cómo proteger el contenido de los pocillos para que no se seque durante la reacción. ¿Cómo se obtienen los sueros para tipificación HLA?

Actualmente, los anticuerpos monoclonales fijadores del complemento (MAT) se pueden utilizar para la tipificación del complemento. Se utilizan tanto en la prueba de microlinfocitotoxicidad como en la prueba de inmunofluorescencia. La contabilidad de la reacción es posible tanto por microscopía de luminiscencia como mediante el uso de un citómetro de flujo.

		metodo moderno		determinación de la tipificación del ADN de los genes HLA. Él
basado en diversas variantes de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y la hibridación molecular.
	estos métodos		se encuentra en	acumulación de lo necesario		análisis de importantes
cantidad			su polimerización y en uso, sondas complementarias
secciones analizadas de ADN. Además, una de las ventajas de la tipificación del ADN es que no
se requiere la presencia de linfocitos viables y se utiliza el ADN de cualquier célula. Pero
El ADN se puede almacenar durante años o décadas. Requerido para la reacción.						caro

sondas de oligonucleótidos, cebadores.

El uso del método genético molecular - tipificación de ADN, permitió ampliar significativamente la comprensión del polimorfismo de los loci genéticos previamente conocidos del sistema HLA-A, B, C, DR, DQ, DP. Además, se han descubierto nuevos genes, en particular TAP, DM, LMP y otros. Se han descubierto genes HLA clase I - E, F, G, H, pero la función de sus productos aún no está clara. A diciembre de 1998, el número de alelos identificados de los genes del complejo HLA era de 942. Y al 31 de diciembre de 2000, se identificaron 1349 alelos por tipificación genética molecular del ADN, y su detección continúa creciendo.

NUEVA NOMENCLATURA HLA. Como ya se señaló, las moléculas HLA de clase 1 consisten en cadenas α y β. Y solo es polimórficoα-chain.p Las variantes alélicas de genes codificantes recibieron un nombre de cuatro dígitos en la nueva nomenclatura (por ejemplo, HLA-A0201 en lugar de la designación utilizada anteriormente HLA-A2, y 12 (!) Nuevos subtipos de este antígeno (nuevas variantes alélicas ) fueron identificados por métodos de biología molecular, los cuales recibieron el nombre A0201, A0202, A0203,… hasta A0212). HLA-B27 tiene 9 variantes de especificidad alélica, y solo algunas de ellas se asocian con espondilitis anquilosante (esto, por supuesto, aumenta su valor pronóstico).

Eficiencia del trasplante renal alogénico (según los resultados de supervivencia anual en centros de trasplante que han pasado a selección de donantes basada en genética molecular)

centro coordinador de donación de órganos y el Instituto de Inmunología.

Datos aún más impresionantes obtenidos durante los últimos 2-3 años en el curso de programas nacionales (principalmente en los Estados Unidos) e internacionales para el trasplante de médula ósea alogénica, "no relacionada". Gracias a la transición de la selección de pares donante-receptor a la tipificación de ADN y la creación de un banco de donantes con genotipo HLA, que incluye 1,5 millones de personas, la tasa de supervivencia anual de la médula ósea trasplantada se ha incrementado en 10s -20% para 70-80% (!). A su vez, esto condujo a número de trasplantes de médula ósea de donantes no emparentados en los Estados Unidos (que actualmente tiene el mayor número de donantes y receptores genotipados) de 1993 a 1997. aumentó más de 8 veces. Impresionante

El efecto de los trasplantes de médula ósea no relacionados se logra únicamente a través de la selección de pares de donante-receptor totalmente compatibles con HLA mediante tipificación de ADN.

El siguiente es un extracto del libro del académico R.V. Petrov "Yo o no yo: Móviles inmunológicos". M., 1983. - 272 págs.

“... Al recibir el Premio Nobel en 1930, en su solemne conferencia sobre este tema, Karl Landsteiner dijo que el descubrimiento de antígenos siempre nuevos en las células del tejido humano

interés teórico. Ha encontrado, entre otras aplicaciones prácticas, aplicaciones forenses.

Imagine la siguiente situación: es necesario determinar la identidad de una mancha de sangre. ¿De quién es la sangre, humana o animal? No es necesario explicar que esta situación suele estar relacionada con la medicina forense. Y la solución del problema muchas veces se convierte en la respuesta a las preguntas principales de la investigación. La única forma de responder es con la ayuda de sueros inmunes. De ninguna manera

otros indicadores para distinguir entre la sangre de una persona y, por ejemplo, un perro es imposible. Los métodos de investigación microscópicos o bioquímicos son impotentes.

Los médicos forenses tienen en su arsenal un conjunto de sueros inmunes de diversa especificidad: contra proteínas humanas, de caballo, de pollo, de perro, de vaca, de gato, etc. La mancha en estudio se lava y luego se ponen reacciones de precipitación. En este caso, se utiliza todo el conjunto de sueros inmunes. Qué suero causará la precipitación, el tipo de animal o persona pertenece a la sangre de la mancha en estudio.

Digamos que el científico forense concluye: "El cuchillo está manchado con sangre humana". Y el sospechoso de asesinato dice: “Sí. Pero esta es mi sangre. No hace mucho, me corté el dedo con este cuchillo. Luego continúa el examen. En la mesa de los criminólogos aparecen antisueros contra grupos sanguíneos y antígenos HLA. Y la inmunología nuevamente da la respuesta exacta: la sangre pertenece al grupo AB, contiene el factor M, Rh-negativo, antígenos de histocompatibilidad tal y cual, etc. La situación es definitiva.

explicado. La característica resultante coincide completamente con las características antigénicas de la sangre del sospechoso. Por lo tanto, dijo la verdad, es de hecho su sangre.

Detengámonos en una situación más, que tiene una gran connotación moral. Imagine que una guerra u otro desastre separó a los padres de sus hijos. Los niños perdieron sus nombres y apellidos. ¿Es realmente imposible encontrar a su hijo entre otros? Después de todo, los antígenos eritrocíticos y HLA se heredan. Y si el padre y la madre no tienen un factor, entonces el hijo tampoco puede tenerlo. Por el contrario, si ambos padres pertenecen al tipo A, entonces el niño no puede tener sangre tipo B o AB. Lo mismo ocurre con los antígenos HLA. Y con un grado de certeza muy alto”.

Establecer la autenticidad de los restos de los miembros de la familia real de Nicolás II se llevó a cabo de esta manera, utilizando la tipificación de ADN.

por ejemplo, en Inglaterra, las cuestiones relativas a la determinación de la paternidad son particularmente escrupulosas. Pero allí se asocia con mayor frecuencia no con la guerra. Las leyes estrictas sobre paternidad se explican por leyes estrictas sobre herederos y derechos de herencia de capitales, títulos, derechos, privilegios.

Imagínense un señor que declara heredero a un joven que no ha nacido de su mujer. Entonces puede ser necesario probar que el joven es su hijo. O de repente aparece un señor que se declara hijo ilegítimo y, por tanto, heredero de un millonario. Puede que sea cierto, pero puede que este señor sea un estafador. La pregunta se resuelve mediante el análisis de antígenos de padres e hijos.

La distribución de antígenos HLA resultó ser diferente en representantes de diferentes razas de nacionalidades. Desde 1966, se ha llevado a cabo en todos los países del mundo un estudio intensivo de la estructura de los antígenos de compatibilidad tisular, iniciado por la OMS. Pronto el mapa del mundo se cubrió de jeroglíficos inmunológicos que mostraban dónde y en qué combinación se encuentran los antígenos.

HLA. Ahora quizás no sea necesario, como Thor Heyerdahl, equipar una expedición en un bote de juncos para probar la migración de la población de América del Sur a las islas de Polinesia. Basta mirar un atlas moderno de distribución de antígenos HLA y decir con confianza que en ambas regiones geográficas hay marcadores genéticos comunes.

Polimorfismo de HLA clásico: antígenos detectados por métodos serológicos y mediados por células

El complejo principal de histocompatibilidad es un grupo de genes y los antígenos de superficie celular que codifican y que desempeñan un papel fundamental en el reconocimiento extraño y el desarrollo de una respuesta inmunitaria. El complejo mayor de histocompatibilidad humano se llama HLA. HLA fue descubierto en 1952 mientras estudiaba antígenos leucocitarios. Los antígenos HLA son glicoproteínas ubicadas en la superficie celular y codificadas por un grupo de genes estrechamente vinculados en el sexto cromosoma. Los antígenos HLA desempeñan un papel fundamental en la regulación de la respuesta inmunitaria a antígenos extraños y son antígenos potentes en sí mismos.

Los antígenos HLA se clasifican en antígenos de clase I y antígenos de clase II. Los antígenos HLA de clase I son necesarios para el reconocimiento de las células transformadas por los linfocitos T citotóxicos.

La función más importante de los antígenos HLA de clase II es garantizar la interacción entre los linfocitos T y los macrófagos durante la respuesta inmunitaria. Los T-helpers reconocen un antígeno extraño solo después de que ha sido procesado por macrófagos, combinado con antígenos HLA de clase II y la aparición de este complejo en la superficie del macrófago.

La capacidad de los linfocitos T para reconocer antígenos extraños solo en combinación con antígenos HLA se denomina restricción HLA. La determinación de antígenos HLA de clases I y II es de gran importancia en inmunología clínica y se utiliza, por ejemplo, en la selección de parejas donante-receptor antes del trasplante de órganos.

El descubrimiento de MHC se produjo en el estudio de cuestiones de injerto de tejido intraespecífico. Los loci genéticos responsables del rechazo de tejidos extraños forman una región en el cromosoma llamada complejo mayor de histocompatibilidad (MHC).

Luego, inicialmente de forma hipotética, basada en la fenomenología celular, y luego de forma experimentalmente bien documentada utilizando métodos de biología molecular, se descubrió que el receptor de células T no reconoce el antígeno extraño en sí mismo, sino su complejo con moléculas controladas por genes del complejo mayor de histocompatibilidad. En este caso, tanto la molécula MHC como el fragmento de antígeno entran en contacto con el TCR.

MHC codifica dos conjuntos de proteínas celulares altamente polimórficas, llamadas moléculas MHC de clase I y clase II. Las moléculas de clase I pueden unirse a péptidos de 8-9 residuos de aminoácidos, las moléculas de clase II son algo más largas.

El alto polimorfismo de las moléculas MHC, así como la capacidad de cada célula presentadora de antígenos (APC) para expresar varias moléculas MHC diferentes, hace posible que las células T presenten muchos péptidos antigénicos diferentes.

Cabe señalar que, aunque las moléculas del MHC suelen llamarse antígenos, exhiben antigenicidad solo cuando son reconocidas por el sistema inmunitario de un organismo genéticamente diferente en lugar del propio, por ejemplo, durante un alotrasplante de órganos.

La presencia de genes en el MHC, la mayoría de los cuales codifican polipéptidos inmunológicamente significativos, sugiere que este complejo evolucionó y evolucionó específicamente para la implementación de formas inmunitarias de protección.

También hay moléculas MHC de clase III, pero las moléculas MHC de clase I y las moléculas MHC de clase II son las más importantes desde el punto de vista inmunológico.

Receptor de células B o receptor de antígeno de células B(Inglés) receptor de antígeno de células B, BCR) es un receptor de membrana para las células B que reconoce específicamente un antígeno. De hecho, el receptor de células B es una forma de membrana de anticuerpos (inmunoglobulinas) sintetizados por este linfocito B y tiene la misma especificidad de sustrato que los anticuerpos secretados. Este receptor, al igual que los anticuerpos, puede existir en varias formas, según la clase a la que pertenezcan sus cadenas pesadas. Desde el receptor de células B, comienza la cadena de transmisión de señales hacia la célula que, dependiendo de las condiciones, puede conducir a la activación, proliferación, diferenciación o apoptosis de los linfocitos B. Las señales provenientes (o no) del receptor de células B y su forma inmadura (pre-receptor de células B) son críticas en la maduración de los linfocitos B y en la formación del repertorio de anticuerpos del cuerpo.

Además de la forma de membrana del anticuerpo, el complejo del receptor de células B incluye un heterodímero de proteína auxiliar Igα / Igβ (CD79a / CD79b), que es estrictamente necesario para el funcionamiento del receptor. La transmisión de señales del receptor se lleva a cabo con la participación de moléculas como Lyn, SYK, Btk, PI3K, PLCγ2 y otras.

Se sabe que el receptor de células B juega un papel especial en el desarrollo y mantenimiento de enfermedades sanguíneas malignas de células B. En este sentido, se ha generalizado la idea de utilizar inhibidores de la transducción de señales de este receptor para el tratamiento de estas enfermedades. Varios de estos medicamentos han demostrado ser efectivos y actualmente se encuentran en ensayos clínicos.

WPC está formado por un gran grupo de genes ubicados en el brazo corto del cromosoma 6. Con base en diferencias estructurales y funcionales, estos genes se dividen en tres clases, dos de las cuales, clase I y clase II, pertenecen a los genes HLA, originalmente descubiertos debido a su importancia en el injerto de tejido entre individuos no emparentados.

genes las clases I y II codifican proteínas de la superficie celular que desempeñan un papel fundamental en el inicio de una respuesta inmunitaria, especialmente en el "reconocimiento" de un antígeno por parte de los linfocitos, que no pueden responder a un antígeno a menos que forme un complejo con una molécula HLA en la superficie de una célula que contiene el antígeno. Se conocen muchos cientos de alelos HLA de clase I y II diferentes, y diariamente se descubren nuevos alelos, lo que los convierte en los loci más polimórficos del genoma humano.

Genes de clase I(HLA-A, HLA-B y HLA-C) codifican proteínas que son parte integral de la membrana plasmática de todas las células nucleares. Las proteínas de clase I constan de dos subunidades polipeptídicas: una cadena pesada variable, codificada dentro del MHC, y un polipéptido no polimórfico, b2-microglobulina, codificado por un gen ubicado fuera del MHC y mapeado en el cromosoma 15. Derivado de proteínas intracelulares, péptidos se forman por escisión proteolítica por grandes proteasas multifuncionales; los péptidos luego se mueven a la superficie celular y se adhieren a las moléculas de clase I, formando un antígeno peptídico para las células T citotóxicas.

Región clase II consta de varios loci, como HLA-DP, HLA-DQ y HLA-DR, que codifican proteínas de superficie de la envoltura celular. Cada molécula de clase II es un heterodímero formado por las subunidades a y b codificadas en el MHC. Las moléculas de clase II son péptidos derivados de proteínas extracelulares que son captadas por los lisosomas y procesadas en péptidos reconocidos por las células T.

Dentro de WPC hay loci de otros genes, pero no están funcionalmente relacionados con los genes HLA de clase I y II y no determinan la histocompatibilidad ni las respuestas inmunitarias. Sin embargo, algunos de estos genes están asociados con enfermedades como la hiperplasia suprarrenal congénita, causada por la deficiencia de 21-hidroxilasa, y la hemocromatosis, una enfermedad hepática causada por la acumulación de hierro.

Alelos y haplotipos del complejo mayor de histocompatibilidad (HLA)

Sistema HLA Puede parecer confuso al principio, ya que la nomenclatura utilizada para definir y describir los diferentes alelos HLA ha sufrido cambios fundamentales a medida que ha proliferado la secuenciación del ADN del MHC. De acuerdo con el sistema tradicional más antiguo de nomenclatura HLA, los diferentes alelos diferían serológicamente entre sí. Los tipos de HLA individuales se determinaron por cómo un panel de diferentes antisueros o linfocitos sensibles reaccionaron a las células.

antisueros y se obtuvieron células de cientos de mujeres embarazadas que desarrollaron una respuesta inmune contra los antígenos paternos tipo I y II expresados ​​por los fetos durante el embarazo. Si las células de dos individuos no relacionados provocaban la misma respuesta cuando se añadían al panel de anticuerpos y células, se consideraba que tenían los mismos tipos y alelos de HLA, indicados por su número, por ejemplo, B27 en el locus HLA-B clase I o DR3 en el locus HLA-B DR clase II.

Sin embargo, después identificación y la secuenciación de los genes responsables de codificar las cadenas MHC clase I y clase II, los alelos HLA individuales inicialmente determinados serológicamente, incluso dentro de un solo alelo serológico, resultaron estar compuestos de múltiples alelos determinados por diferentes variantes de la secuencia de ADN. Los 100 tipos HLA-A, B, C, DR, DQ y DP definidos serológicamente ahora incluyen más de 1300 alelos definidos a nivel de secuencia de ADN.

por ejemplo, en gen HLA-B, previamente determinado por reacción serológica como un solo alelo B27, se encontraron más de 24 variantes diferentes de la secuencia de ácido nucleico. La mayoría de las variantes de ADN, aunque no todas, representan un cambio en el codón del triplete y, por lo tanto, en el aminoácido del péptido codificado por ese alelo. Cada alelo que cambia un aminoácido en el péptido HLA-B recibe su propio número de secuencia adicional, por ejemplo, alelo 1, 2, etc. en el grupo de alelos correspondientes al alelo B27 anteriormente único, y ahora se llama HLA- B * 2701, HLA-B * 2702 y etc.

Equipo alelos HLA forma un haplotipo en varios loci de clase I y II en un cromosoma dado. Los alelos son codominantes; cada padre tiene dos haplotipos y expresa ambos. Estos loci están ubicados lo suficientemente cerca uno del otro, de modo que en una familia en particular, el haplotipo se puede transmitir al niño como un solo bloque. Como resultado, el padre y el hijo comparten un haplotipo común y la probabilidad de que dos hermanos hereden el mismo haplotipo HLA es del 25 %.

Porque el injerto de tejidos trasplantados en gran parte consistente con el grado de similitud entre los haplotipos HLA del donante y el receptor (y los tipos de sangre ABO), el mejor donante de médula ósea o de órganos es un hermano del receptor compatible con ABO y con HLA idéntico.

En cualquier etnia agrupar algunos alelos HLA a menudo encontrado, mientras que otros rara vez o nunca. Asimismo, algunos haplotipos ocurren con más frecuencia de lo esperado, mientras que otros son extremadamente raros o no ocurren en absoluto. Por ejemplo, la mayoría de las 3x107 combinaciones teóricamente posibles de alelos en el haplotipo nunca ocurren en la población blanca. Esta limitación en la diversidad de haplotipos en una población posiblemente se deba a una situación denominada desequilibrio de ligamiento y puede explicarse por la compleja interacción de múltiples factores.

Estas factores incluyen bajas tasas de recombinación meiótica debido a la pequeña distancia entre los loci HLA; la influencia del medio ambiente, proporcionando selección positiva para combinaciones específicas de alelos HLA que forman el haplotipo; y factores históricos, como hace cuánto tiempo comenzó la población, el número de fundadores y la intensidad de la inmigración que ocurrió (ver más adelante en este capítulo).

Entre poblaciones también hay diferencias significativas en las frecuencias de alelos y haplotipos. Lo que es un alelo o haplotipo común en una población puede ser muy raro en otra. Las diferencias en la distribución y frecuencia de alelos y haplotipos dentro del MHC son el resultado de una interacción compleja de factores genéticos, ambientales e históricos en cualquier población en particular.

COMPLEJO PRINCIPAL DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC), un complejo de genes que codifican proteínas responsables de la presentación (presentación) de antígenos (consulte Células presentadoras de antígenos) a los linfocitos T durante una respuesta inmunitaria. Inicialmente, los productos de estos genes se identificaron como antígenos que determinan la compatibilidad de los tejidos, lo que determinó el nombre del complejo (del inglés major histocompatibility complex). En los seres humanos, los antígenos del MHC (y el propio complejo) se denominan HLA (del inglés human leukocyte antigens), ya que originalmente se encontraban en los leucocitos. El complejo HLA está ubicado en el sexto cromosoma e incluye más de 200 genes divididos en 3 clases. La división en clases se debe a las peculiaridades de la estructura de las proteínas codificadas por ellas ya la naturaleza de los procesos inmunitarios provocados. Entre los genes de las dos primeras clases, están los llamados genes clásicos, que se caracterizan por un polimorfismo extremadamente alto: cada gen está representado por cientos de formas alélicas. Los genes MHC humanos clásicos incluyen genes HLA A, B, C (clase I), genes DR, DP y DQ (clase II). Los genes del MHC de clase III codifican proteínas que no están relacionadas con la histocompatibilidad y la presentación de antígenos. Controlan la formación de factores del sistema del complemento, algunas citoquinas, proteínas de choque térmico.

Los productos finales de los genes MHC son glicoproteínas que se incorporan a la membrana celular. Las glicoproteínas MHC de clase I están presentes en las membranas celulares de casi todas las células nucleadas, y las glicoproteínas de clase II están presentes solo en las células presentadoras de antígenos (células dendríticas, macrófagos, linfocitos B, algunas células activadas). Durante la formación de las glicoproteínas MHC de clase I, se incorporan a su composición fragmentos de proteínas intracelulares formadas durante la proteólisis, y en el caso de las de clase II, se incorporan proteínas del espacio intercelular absorbidas por la célula. Entre ellos pueden encontrarse componentes de microorganismos patógenos. Como parte de las glicoproteínas MHC, son llevadas a la superficie celular y reconocidas por los linfocitos T. Este proceso se denomina presentación de antígenos: los péptidos antigénicos extraños se presentan a las células T citotóxicas como parte de las glicoproteínas MHC de clase I, a las células T colaboradoras, como parte de las glicoproteínas MHC de clase II.

Los productos de varias formas alélicas de los genes MHC difieren en su afinidad por varios péptidos. La efectividad de la protección contra un patógeno particular depende de qué alelos de los genes MHC estén presentes en un organismo dado. Está determinada por la unión de péptidos extraños a las glicoproteínas del MHC de clase II, ya que su presentación a los T-colaboradores es la base de todas las formas de la respuesta inmunitaria. En este sentido, los genes MHC de clase II se consideran genes de respuesta inmunitaria (genes Ir).

En determinadas situaciones, se puede provocar una respuesta inmunitaria como resultado de la presentación de fragmentos peptídicos de las propias proteínas del organismo como parte de moléculas MHC de clase II. La consecuencia de esto puede ser el desarrollo de procesos autoinmunes que, por lo tanto, también están bajo el control de los genes del MHC de clase II.

La determinación de genes MHC clásicos (tipificación de ADN) se lleva a cabo mediante la reacción en cadena de la polimerasa durante el trasplante de órganos y tejidos (para seleccionar pares de donante-receptor compatibles), en la práctica forense (para la negación de paternidad, identificación de delincuentes y víctimas), así como en investigación genogeográfica (para estudiar los vínculos familiares y la migración de pueblos y etnias). Véase también Inmunidad.

Lit.: Yarilin A. A. Fundamentos de inmunología. M., 1999; Devitt H. O. Descubriendo el papel del complejo principal de histocompatibilidad en la respuesta inmune // Revisión anual de inmunología. 2000 vol. Dieciocho; Khaitov R. M., Alekseev L. P. Papel fisiológico del principal complejo de histocompatibilidad humana // Inmunología. 2001. Nº 3.