ЛЕКЦИЯ № 6. Учение за инфекцията 1. Обща характеристика на инфекцията Инфекцията е набор от биологични реакции, с които макроорганизмът отговаря на въвеждането на патоген.Обхватът на проявите на инфекциите може да бъде различен. Екстремни прояви на инфекции

ЛЕКЦИЯ № 8. Антибиотици и химиотерапия

ЛЕКЦИЯ № 9. Въведение в имунологията 1. Понятието имунитет. Видове имунитет Имунологията е наука, чийто предмет на изследване е имунитетът.Инфекциозната имунология изучава моделите на имунната система във връзка с микробни агенти, специфични

ЛЕКЦИЯ № 11. Антигени 1. Свойства и видове антигени Антигените са високомолекулни съединения. При поглъщане те предизвикват имунна реакция и взаимодействат с продуктите на тази реакция: антитела и активирани лимфоцити.Класификация на антигените.1. от

ЛЕКЦИЯ № 12. Антитела 1. Структурата на имуноглобулините Антителата (имуноглобулините) са протеини, които се синтезират под въздействието на антиген и специфично реагират с него.Състоят се от полипептидни вериги. Има четири вида имуноглобулини в имуноглобулинова молекула.

ЛЕКЦИЯ № 13. Имунопатология 1. Имунодефицитни състояния Имунодефицитните състояния са нарушения на имунния статус и способността за нормален имунен отговор към различни антигени. Тези нарушения са причинени от дефекти в една или повече части на имунната система.

ЛЕКЦИЯ № 14. Приложна имунология 1. Имунодиагностика Имунодиагностиката е използването на имунните отговори за диагностициране на инфекциозни и неинфекциозни заболявания.Имунните реакции са взаимодействието на антиген с продуктите на имунния отговор. По всяко

ЛЕКЦИЯ № 18. Патогенни коки 1. Стафилококи Семейство Staphylococcoceae, род Staphilicoccus.Те са причинители на стафилококова пневмония, неонатален стафилокок, сепсис, пемфигус.Това са малки грам-положителни коки. В намазките са разположени на групи, често

ЛЕКЦИЯ № 20. Дифтерия 1. Морфология и културни свойства Причинителят принадлежи към род Carinobacterium, вид C. difteria.Това са тънки пръчици, прави или леко извити, грам-положителни. Характеризират се с изразен полиморфизъм. Бухаловидни удебеления в краищата -

ЛЕКЦИЯ № 22. Група Рикетсии 1. Характеристика на групата Рикетсиите представляват самостоятелен клас, който е разделен на подкласове a1, a2, b и g.a1 включва семейство Rickettsiaceae, най-важните от които са два рода.1. Род Rickettsia, видовете са разделени на две

ЛЕКЦИЯ № 23. Патогени на ОРВИ 1. Грипните вируси Принадлежат към семейството на ортомиксовирусите. Изолирани са грипни вируси тип А, В и С. Грипният вирус има сферична форма, с диаметър 80-120 nm. Нуклеокапсид със спирална симетрия е рибонуклеопротеинова верига (NP протеин),

ЛЕКЦИЯ № 25. Ентеровирусни инфекции 1. Вирус на полиомиелит Принадлежи към семейство Picornaviridae, род ентеровируси.Това са сравнително малки вируси с икосаедрична симетрия. Средният размер на вирусните частици е 22-30 nm. Устойчив на действието на мастни разтворители. Геном

40. Туберкулоза Причинителят е от род Mycobacterium, вид M. tuberculesis.Това са тънки пръчици, леко извити, не образуват спори и капсули. Повечето от

41. Туберкулоза. Диагностика. Предотвратяване. Лечение Диагноза: 1) микроскопско изследване. Правят се две цитонамазки от храчки. Единият се оцветява от Ziehl-Neelsen, вторият се третира с флуорохром и се изследва чрез директна флуоресценция.

Туберкулозата е хронично заболяване на човека, придружено от увреждане на дихателните органи, лимфните възли, червата, костите и ставите, очите, кожата, бъбреците и пикочните пътища, половите органи и централната нервна система.

Заболяването се причинява от 3 вида микобактерии: Mycobacterium tuberculosis - човешки вид, Mycobacterium bovis - говежди вид, Mycobacterium africanum - междинен вид.

Отдел Firmicutes, род Mycobacterium. Генерична характеристика - устойчивост на киселини, алкохол и основи.

Морфология, тинкториални и културни свойства

Той е типичен представител на род Mycobacterium и има най-голяма киселинна устойчивост. В петна от храчки или органи, микобактериите са малки тънки пръчици с размери 1,5-4 × 0,4 μm, грам-положителни. На изкуствени хранителни среди могат да образуват разклонени форми. Mycobacterium tuberculosis има голям полиморфизъм: има пръчковидна, гранулирана, нишковидна, кокова, филтрируема и L-форма. В резултат на променливостта се появяват форми, потискащи киселината, сред които често се срещат така наречените Fly grains.

Изразен полиморфизъм. Те имат формата на дълги, тънки (M.tuberculosis) или къси, дебели (M.bovis), прави или леко извити пръчки с хомогенна или гранулирана цитоплазма; Грам-положителни, неподвижни, не образуват спори, имат микрокапсула. За идентифицирането им се използва оцветяването по Ziehl-Neelsen. Микобактериите могат да образуват различни морфовари (L-форми на бактерии), които се задържат в тялото дълго време и предизвикват противотуберкулозен имунитет.

Причинителите на туберкулозата се характеризират с бавен растеж, взискателни към хранителни среди. M.туберкулозапринадлежат към аероби, зависими от глицерин. На течни хранителни среди дават растеж под формата на сух кремав филм. По време на вътреклетъчното развитие, както и по време на растеж върху течна среда, се открива характерен корд фактор, поради който микобактериите растат под формата на "влакна". На плътна среда растежът е под формата на кремообразно, сухо, люспесто покритие с неравни ръбове (R-образна форма). Докато растат, колониите придобиват брадавичен вид. Под въздействието на антибактериални агенти патогените променят своите културни свойства, образувайки гладки колонии (S-форми). M. bovis-растат върху хранителна среда по-бавно от M.tuberculosis, зависими от пируват; върху плътни хранителни среди образуват малки сферични, сиво-бели колонии (S-форми).

Висока каталазна и пероксидазна активност. Каталазата е термолабилна. M.tuberculosis синтезира ниацин (никотинова киселина) в големи количества, който се натрупва в хранителната среда и се определя в теста на Конно.

Химичен състав:Основните химични компоненти на микобактериите са протеини, въглехидрати и липиди. Липиди (фосфатиди, корд фактор, туберкулостеаринова киселина) - причиняват резистентност към киселини, алкохоли и основи, предотвратяват фагоцитозата, нарушават пропускливостта на лизозомите, причиняват развитието на специфични грануломи, унищожават клетъчните митохондрии. Микобактериите предизвикват развитие на реакция на свръхчувствителност тип IV (туберкулин).

Фактори на патогенност: oОсновните патогенни свойства се дължат на директно или имунологично медиирано действие на липиди и липидосъдържащи структури.

Антигенна структура:В хода на заболяването се образуват антипротеинови, антифосфатидни и антиполизахаридни антитела към антигени, което показва активността на процеса.

Наличието на липиди - устойчиви на неблагоприятни фактори. Сушенето има малък ефект. Умират при варене.

Основният източник на инфекция е човек с респираторна туберкулоза, който отделя микроби в околната среда с храчки. Основните пътища на предаване на инфекцията са въздушно-капков и въздушно-капков.

Mycobacterium tuberculosis остава жизнеспособна дълго време извън човешкото или животинското тяло. В изсъхнали храчки те живеят до 10 месеца. Поддържайте температура 70°C за 20 минути, а кипене - 5 минути; в 5% разтвор на карболова киселина и разтвор на сублимат 1: 1000 умират за един ден, в 2% разтвор на лизол - за един час. От дезинфектантите те са най-чувствителни към белина и хлорамин.

Патогенеза и клиника

фактори на патогенност. Mycobacterium tuberculosis съдържа ендотоксин. Вирулентните щамове включват специален липид, наречен корд фактор. Вирулентността на микробите се свързва и с наличието на фтионова и миколова киселина, както и на полизахаридно-миколовия комплекс. Кох получава от туберкулозни бактерии токсично вещество от протеинова природа - туберкулин, чийто патогенен ефект се проявява само в заразен организъм. Туберкулинът има свойствата на алерген и в момента се използва при производството на алергични тестове за определяне на инфекцията на човек или животни с микобактерии. Има няколко препарата от туберкулин. "Старият" туберкулин на Кох (алт-туберкулин) е филтрат от топлинно убита 5-6 седмична култура от микробактерии, отглеждани в глицеринов бульон. "Новият" туберкулин на Кох - изсушен микобактериум туберкулоза, смлян в 5% глицерол до хомогенна маса. Туберкулинът се получава от говежди микобактерии. Има и безбаластни туберкулинови препарати (PPD, RT).

Различни имунодефицити допринасят за появата на заболяването. Инкубационният период е от 3 до 8 седмици. до 1 година или повече. В развитието на заболяването се разграничават първична, дисеминирана и вторична туберкулоза, която е резултат от ендогенна реактивация на стари огнища. В зоната на проникване на микобактериите възниква първичен туберкулозен комплекс, състоящ се от възпалително огнище, засегнати регионални лимфни възли и променени лимфни съдове между тях. Разпространението на микроби може да стане бронхо-, лимфо- и хематогенно. Основата на специфичното възпаление при туберкулоза е реакция на свръхчувствителност тип IV, която предотвратява разпространението на микробите в тялото.

Различават се белодробна и извънбелодробна клинична форма на туберкулоза, при която се засягат кости, стави, кожа, бъбреци, ларинкс, черва и други органи.
Обикновено има периоди на подобрение и влошаване; крайният резултат се определя от състоянието на макроорганизма. Болестта може да се развие остро, но по-често протича хронично, в продължение на много години. Отбелязват се слабост, нощно изпотяване, умора, загуба на апетит, леко повишаване на температурата вечер, кашлица. При флуороскопия на белите дробове се открива потъмняване с различна степен: фокално или дифузно.

Противотуберкулозният имунитет е нестерилен инфекциозен, поради наличието в тялото на L-форми на микобактерии.

Диагнозата се извършва с помощта на бактериоскопия, бактериологично изследване и производство на биологична проба. Всички методи са насочени към откриване на микобактерии в патологичен материал: храчка, бронхиални промивки, плеврална и церебрална течност, парчета тъкан от органи.

Задължителните методи на изследване включват бактериоскопско, бактериологично изследване, биологичен тест, туберкулинова диагностика, базирана на определяне на свръхчувствителността на организма към туберкулин. По-често, за откриване на инфекция и алергични реакции, те поставят интрадермален тест на Манту с пречистен туберкулин в стандартно разреждане. За бърза диагностика на туберкулоза се използват RIF (имунофлуоресцентна реакция) и PCR (полимеразна верижна реакция). . За масово проучване на населението, ранно откриване на активни форми на туберкулоза, можете да използвате ELISA (ензимен имуноанализ), насочен към откриване на специфични антитела.

Микробиологичната диагностика включва микроскопски, микробиологични, биологични и серологични методи. Микроскопията е най-разпространеният метод. Той е прост, достъпен, позволява ви бързо да получите отговор. При микроскопия на храчки се избират гнойни плътни частици, внимателно разтрити с тънък слой между две предметни стъкла. Изсушете на въздух, фиксирайте с пламък и оцветете с Ziehl-Nielsen. Mycobacterium tuberculosis - тънки, леко извити пръчици, боядисани в ярко червено; останалата част от подготвителния фон е синя. Недостатъкът на метода е неговата ниска чувствителност. Повишаването на чувствителността на микроскопията при диагностицирането на туберкулоза се постига с помощта на обогатителни методи. Един от тях е хомогенизирането на материала чрез излагането му на различни вещества, които разтварят слуз (алкали, антиформин). След това изследваният материал се центрофугира, от утайката се приготвя намазка и се микроскопира.

По-ефективен е методът на флотация (плаващ), който се основава на факта, че след продължително разклащане на тестовия материал, хомогенизиран със сода каустик с дестилирана вода и ксилен (или бензен), се образува слой пяна, който изплува и улавя Mycobacterium tuberculosis. Слоят от пяна се отстранява и се наслоява върху топло предметно стъкло няколко пъти, докато изсъхне. Това увеличава възможността за откриване на Mycobacterium tuberculosis.

Флуоресцентната микроскопия е по-чувствителна от конвенционалната микроскопия. Препаратът се приготвя, както обикновено, фиксира се със смес на Никифоров и се оцветява с аурамин в разреждане 1: 1000. След това препаратът се обезцветява със солен алкохол и се довършва с кисел фуксин, който „гаси“ луминесценцията на левкоцитите, слузта и тъканни елементи в препаратите, създаващи контраст между тъмен фон и светеща ярка златисто-зелена светлина с Mycobacterium tuberculosis. Препаратът се изследва под флуоресцентен микроскоп. Недостатъкът на микроскопията е възможността за грешки в присъствието на устойчиви на киселина сапрофити.

При отрицателен резултат от микроскопско изследване се използват микробиологични и биологични методи. Материалът за изследване се обработва предварително с 6% разтвор на сярна киселина за унищожаване на чужда микрофлора.

Микробиологичният метод позволява да се открият 20-100 микобактерии в изследвания материал. Киселинноустойчивите сапрофити се диференцират от Mycobacterium tuberculosis чрез културни характеристики (растежът на сапрофитите е възможен при стайна температура в продължение на няколко дни). Недостатъкът на метода е бавният растеж на Mycobacterium tuberculosis върху хранителни среди (културите се държат в термостат за 2-3 месеца).

Разработени са ускорени методи за изолиране на култури от Mycobacterium tuberculosis - Price и Shkolnikova. Същността на тези методи се състои в това, че тестовият материал се нанася върху предметно стъкло, обработва се със сярна киселина, измива се с изотоничен разтвор на натриев хлорид и се поставя в хранителна среда с цитратна кръв. След 5-7 дни стъклото се отстранява и се изследва по Ziehl-Nielsen. Микроскопски при малко увеличение. Микроколониите от вирулентни щамове микобактерии изглеждат като снопове, плитки.

Когато се използва биологичен метод, обработеният патологичен материал се инжектира в ингвиналната област на морските свинчета. Дори при наличие на единични туберкулозни микобактерии, животното се разболява: след 6-10 дни регионалните лимфни възли се увеличават, в тях се откриват голям брой туберкулозни микобактерии. След 3-6 седмици животното умира от генерализирана туберкулозна инфекция.

За да се определи инфекцията на тялото с микобактерии, се използва алергичен метод. Приложете интрадермален туберкулинов тест (реакция на Mantoux) и кожен тест на Pirquet. Заразени с микобактерии, се образуват зачервяване и подуване на мястото на инжектиране на туберкулин.

Според степента на ефективност противотуберкулозните лекарства се разделят на групи: група А - изониазид, рифампицин; група В - пиразинамид, стрептомицин, флоримицин; група С - ПАСК, тиоацетозон. При наличие на съпътстваща микрофлора и мултирезистентност на микобактериите се използват флуорохинолони и алдозон.

Специфичната профилактика се извършва чрез въвеждане на жива ваксина - BCG (BCG), интрадермално на 2-5-ия ден след раждането на детето. Извършват се последващи реваксинации. Предварително се поставя тест на Манту, за да се идентифицират туберкулиноотрицателни лица, които подлежат на реваксинация.

Опортюнистични микобактерии: семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium. Подобни по биологични свойства, но устойчиви на противотуберкулозни лекарства.

Микобактерии

Родът Mycobacterium (семейство Mycobacteriaceae, разред Actinomycetales) включва повече от 100 вида, широко разпространени в природата. Повечето от тях са сапрофити и условно патогенни. При хората се причиняват туберкулоза (Mycobacterium tuberculosis - в 92% от случаите, Mycobacterium bovis - 5%, Mycobacterium africanus - 3%) и проказа (Mycobacterium leprae).

Mycobacterium tuberculosis.

Mycobacterium tuberculosis, основният причинител на туберкулозата при хората, е открит през 1882 г. от Р. Кох.

Туберкулозата (фтиза) е хронично инфекциозно заболяване. В зависимост от локализацията на патологичния процес се разграничават туберкулоза на дихателните органи и извънбелодробни форми (туберкулоза на кожата, костите и ставите, бъбреците и др.). Локализацията на процеса до известна степен зависи от начините на проникване на микобактериите в човешкото тяло и вида на патогена.

Морфология, физиология. Mycobacterium tuberculosis са грам-положителни прави или леко извити пръчици 1-4 x 0,3-0,4 µm. Високото съдържание на липиди (40%) придава на клетките на Mycobacterium tuberculosis редица характерни свойства: устойчивост на киселини, основи и алкохол, трудно възприемане на анилинови багрила (методът на Ziehl-Neelsen се използва за оцветяване на туберкулозни бацили, по този метод те са боядисани в розово). Храчките не могат да съдържат други киселинноустойчиви микроорганизми, така че тяхното откриване е индикация за възможна туберкулоза. В културите има гранулирани форми, разклонени, зърната на мухата са сферични, киселинно съвместими, лесно се оцветяват по Грам (+). Възможен е преход към филтрирани и L-форми. Те са неподвижни, не образуват спори и капсули.

За размножаване на Mycobacterium tuberculosis в лабораторни условия се използват комплексни хранителни среди, съдържащи яйца, глицерин, картофи и витамини. Стимулират растежа на микобактериите аспарагинова киселина, амониеви соли, албумин, глюкоза, туин-80. Най-често използваната среда е Lowenstein-Jensen (яйчна среда с добавка на картофено брашно, глицерин и сол) и синтетичната среда на Soton (съдържа аспарагин, глицерин, железен цитрат, калиев фосфат). Mycobacterium tuberculosis се възпроизвежда бавно. Периодът на генериране е дълъг - деленето на клетките при оптимални условия се извършва веднъж на 14-15 часа, докато повечето бактерии от други родове се делят след 20-30 минути. Първите признаци на растеж могат да бъдат открити 8-10 дни след сеитбата. След това (след 3-4 седмици) върху твърди среди се появяват набръчкани, сухи колонии с назъбени ръбове (наподобяващи карфиол). В течните среди първо се образува деликатен филм на повърхността, който се удебелява и пада на дъното. Средата остава прозрачна.

Те са облигатни аероби (заселват се във върховете на белите дробове с повишена аерация). Бактериостатини (малахит или брилянтно зелено) или пеницилин се добавят към средата за потискане на растежа на свързаната микрофлора.

Признаци, които се използват за разграничаване на Mycobacterium tuberculosis от някои други микобактерии, открити в изследваните материали:

време на растеж по време на изолация, дни

загуба на активност на каталаза след нагряване в продължение на 30 минути при 68°C

Обозначения: + - наличие на знак, - - липса на знак, ± - знакът е нестабилен.

Антигени.Клетките на микобактериите съдържат съединения, чиито протеинови, полизахаридни и липидни компоненти определят антигенните свойства. Образуват се антитела срещу туберкулинови протеини, както и срещу полизахариди, фосфатиди, корд фактор. Специфичността на антителата към полизахариди, фосфатиди се определя в RSK, RNGA, утаяване в гела. Антигенният състав на M. tuberculosis, M. bovis, M. leprae и други микобактерии (включително много сапрофитни видове) е подобен. Туберкулиновият протеин (туберкулин) има изразени алергенни свойства.

съпротива.Веднъж попаднали в околната среда, Mycobacterium tuberculosis запазват своята жизнеспособност за дълго време. И така, в изсушена храчка или прах микроорганизмите оцеляват няколко седмици, във влажна храчка - 1,5 месеца, върху предмети около пациента (бельо, книги) - повече от 3 месеца, във вода - повече от година; в почвата - до 6 месеца. Тези микроорганизми се задържат дълго време в млечните продукти.

Mycobacterium tuberculosis е по-устойчив на действието на дезинфектанти от другите бактерии – за унищожаването им са необходими по-високи концентрации и по-продължително време на експозиция (фенол 5% – до 6 часа). При варене умират моментално, чувствителни са към пряка слънчева светлина.

Екология, разпространение и епидемиология.Туберкулозата в света засяга 12 милиона души, други 3 милиона се разболяват всяка година. В естествени условия M. tuberculosis причинява туберкулоза при хората и човекоподобните маймуни. От лабораторните животни силно чувствителни са морските свинчета, а по-малко зайците. Към M. bovis, причинителят на туберкулозата при говеда, свине и хора, зайците са силно чувствителни и по-малко морските свинчета. M. africanus причинява туберкулоза при хората в Субсахарска Африка.

Източник на инфекция при туберкулоза са хора и животни с активна туберкулоза, с наличие на възпалителни и деструктивни промени, които секретират микобактерии (предимно белодробни форми). Един болен човек може да зарази от 18 до 40 души. Единичен контакт за инфекция не е достатъчен (основното условие е продължителен контакт). Степента на чувствителност също има значение за инфекцията.

Един болен човек може да отдели от 7 до 10 милиарда туберкулозни микобактерии на ден. Най-честият е въздушно-капковият път на заразяване, при който патогенът навлиза в тялото през горните дихателни пътища, понякога през лигавиците на храносмилателния тракт (храносмилателен път) или през увредена кожа.

Патогенност.Микобактерии не синтезиратекзо- и ендотоксин. Увреждането на тъканите причинява редица вещества на микробната клетка. По този начин патогенността на туберкулозните патогени е свързана с директен или имунологично медииран увреждащ ефект на липидите ( восък D, мурамин дипептид, фтионови киселини, сулфатиди ), което се проявява, когато бъдат унищожени. Действието им се изразява в развитие на специфични грануломи и увреждане на тъканите. Токсичният ефект се упражнява от гликолипид (трехалосодимиколат), т.нар. кордов фактор . Той разрушава митохондриите на клетките на заразения организъм, нарушава функцията на дишането и инхибира миграцията на левкоцитите към засегнатия фокус. Mycobacterium tuberculosis в култури с кордов фактор образуват извити нишки.

Патогенеза на туберкулозата.Туберкулозата е хронична грануломатозна инфекция, която може да засегне всяка тъкан, с честота при деца: бели дробове, лимфни възли, кости, стави, менинги; при възрастни: бели дробове, черва, бъбреци.

Първична туберкулоза (детски тип) – Инфекцията може да продължи няколко седмици. В зоната на проникване и размножаване на микобактерии възниква възпалително огнище (първичният ефект е инфекциозен гранулом), се наблюдава сесибилизация и специфичен възпалителен процес в регионалните лимфни възли (при увреждане на белите дробове - гръдни, фарингеални лимфоидни натрупвания , сливици) - образува се така нареченият първичен туберкулозен комплекс (обикновено се засяга долният лоб на десния бял дроб). Тъй като се развива състояние на сенсибилизация, възпроизвеждането в сенсибилизиран орган води до специфични промени в тъканта: микроорганизмите се абсорбират от макрофагите → около тях се образува бариера (фагозома) → лимфоцитите атакуват тези клетки (облицовка по периферията на фокуса) → образуват се специфични туберкули (tuberculum - туберкул) - малки (диаметър 1-3 мм), зърнести, бели или сиво-жълти. Вътре има бактерии, след това граничен пояс от (гигантски или епителиоидни) клетки, след това лимфоидни клетки, след това фиброидна тъкан. Туберкулите могат да се слеят в конгломерати → съдова компресия → нарушения на кръвообращението → некроза в центъра на конгломерата под формата на сухи трохи, подобни на сирене (казеозна некроза). Съдовата стена може да стане некротична → кървене.

Образуваната туберкулоза може:

● персистират дълго време (не са придружени от клинични прояви);

● с доброкачествен ход на заболяването, първичният фокус може да се разпадне, засегнатата област може да бъде белязана (функцията на органа не е нарушена) или калцифицирана (образуват се огнища на Гон, които остават за цял живот без клинични прояви). Този процес обаче не завършва с пълното освобождаване на организма от патогена. Туберкулозните бактерии персистират в лимфните възли и други органи в продължение на много години, понякога през целия живот. Такива хора, от една страна, имат имунитет, а от друга, остават заразени.

● Може да настъпи омекване и инфилтрация на първичната лезия → това може да бъде придружено от пробив на лезията в близките тъкани → може да доведе до разкъсване на бронха → некротичната тъкан се приплъзва в лумена на бронха → кухина с форма на лъжица (каверна ) е формиран.

Ако този процес се случи в червата или на повърхността на кожата, се образува туберкулозна язва.

Хронична туберкулоза (възрастен тип) възниква в резултат на реинфекция (често ендогенна). Активирането на първичния комплекс се развива в резултат на намалена резистентност на тялото, което се улеснява от неблагоприятни условия на живот и труд (лошо хранене, ниска инсолация и аерация, ниска подвижност), захарен диабет, силикоза, пневмокониоза, физическа и психическа травма, други инфекциозни заболявания. заболявания, генетично предразположение. Жените са по-склонни да станат хронично болни. Активирането на първичния туберкулозен комплекс води до генерализиране на инфекциозния процес.

● Най-често белодробна (горна и задна част на горния лоб) с образуване на кухини, стафилококи и стрептококи могат да се размножават в стените на кухините → изтощителна треска; ако стените на кръвоносните съдове са ерозирани → хемоптиза. Образуват се белези. Понякога има усложнения: туберкулозна пневмония (с внезапно изтичане на ексудат от фокуса) и плеврит (ако увредените участъци на белите дробове са близо до плеврата). Следователно всеки плеврит трябва да се разглежда като туберкулозен процес до доказване на противното.

● Инфекцията може да се разпространи хематогенно и лимфогенно.

● Бактериите могат да се разпространят в близките тъкани.

● Може да се движи по естествени пътища (от бъбреците до уретерите).

● Може да се разпространи през кожата.

● Може да се развие туберкулозен сепсис (натоварен с микроорганизми материал от туберкули навлиза в голям съд).

Разпространението на патогени води до образуване на туберкулозни огнища в различни органи, склонни към гниене. Тежката интоксикация причинява тежки клинични прояви на заболяването. Генерализацията води до увреждане на органите на пикочно-половата система, костите и ставите, менингите, очите.

Клиниказависи от локализацията на лезията, често е продължително неразположение, бърза умора, слабост, изпотяване, загуба на тегло, вечер - субфибрилна температура. Ако са засегнати белите дробове - кашлица, с разрушаване на белодробните съдове - кръв в храчките.

Имунитет.Инфекцията с Mycobacterium tuberculosis не винаги води до развитие на заболяването. Чувствителността зависи от състоянието на макроорганизма. Тя се засилва значително, когато човек е в неблагоприятни условия, които намаляват общата устойчивост (изтощителна работа, недостатъчно и недохранване, лоши жилищни условия и др.). Допринася за развитието на туберкулозен процес и редица ендогенни фактори: захарен диабет; заболявания, лекувани с кортикостероиди; психични заболявания, придружени от депресия, и други заболявания, които намаляват съпротивителните сили на организма. Все още не е изяснено значението на образуваните в организма антитела за формирането на резистентност към туберкулозната инфекция. Смята се, че антителата срещу Mycobacterium tuberculosis са "свидетели" на имунитета и нямат инхибиторен ефект върху патогена.

Клетъчният имунитет е от голямо значение. Индикаторите за неговите промени са адекватни на хода на заболяването (според реакцията на бластна трансформация на лимфоцитите, цитотоксичния ефект на лимфоцитите върху целевите клетки, съдържащи микобактериални антигени, тежестта на реакцията на инхибиране на миграцията на макрофагите). Т-лимфоцитите, след контакт с антигени на микобактерии, синтезират медиатори на клетъчния имунитет, които повишават фагоцитната активност на макрофагите. При потискане на функцията на Т-лимфоцитите (тимектомия, прилагане на антилимфоцитни серуми, други имуносупресори) туберкулозният процес протича бързо и тежко.

Туберкулозните микробактерии се унищожават вътреклетъчно в макрофагите. Фагоцитозата е един от механизмите, водещи до освобождаване на тялото от Mycobacterium tuberculosis, но често е непълна.

Друг важен механизъм, който помага за ограничаване на възпроизводството на микобактерии, фиксирайки ги в огнищата, е образуването на инфекциозни грануломи с участието на Т-лимфоцити, макрофаги и други клетки. Това демонстрира защитната роля на ХЗТ.

Имунитетът при туберкулоза по-рано се наричаше нестерилен. Но не само запазването на живи бактерии, които поддържат повишена резистентност към суперинфекция, е важно, но и феноменът на "имунологичната памет". При туберкулоза се развива реакцията на ХЗТ.

Лабораторна диагностикатуберкулозата се извършва чрез бактериоскопски, бактериологични и биологични методи. Понякога се използват алергологични тестове.

Бактериологичен метод . Mycobacterium tuberculosis се открива в тестовия материал чрез микроскопия на петна, оцветени по Ziehl-Neelsen и с помощта на луминесцентни багрила (най-често аурамин). Можете да използвате центрофугиране, хомогенизиране, флотация на материала (хомогенизиране на ежедневната храчка → добавяне на ксилен (или толуен) към хомогената → ксилен изплува, увличайки микобактериите → този филм се събира върху стъкло → ксиленът се изпарява → получава се петно ​​→ оцветяване , микроскопия). Бактериоскопията се счита за показателен метод. Прилагайте ускорени методи за откриване на микобактерии в култури, например по метода на Price (микроколонии). Микроколониите също така позволяват да се види наличието на фактора на кордата (основния фактор на вирулентност), поради което бактериите, които го образуват, се сгъват в плитки, вериги и снопове.

Бактериологичен метод е основната в лабораторната диагностика на туберкулозата. Изолираните култури се идентифицират (диференцират от други видове микобактерии), определя се чувствителността към антимикробни лекарства. Този метод може да се използва за проследяване на ефективността на лечението.

Серологични методи не се използват за диагностика, тъй като няма връзка между съдържанието на антитела и тежестта на процеса. Може да се използва в изследователска работа.

биологичен метод използва се в случаите, когато патогенът е трудно да се изолира от тестовия материал (най-често при диагностицирането на бъбречна туберкулоза от урина) и за определяне на вирулентността. Материал от пациента се използва за заразяване на лабораторни животни (морски свинчета, възприемчиви към M. tuberculosis, зайци, възприемчиви към M. bovis). Наблюдението се извършва 1-2 месеца преди смъртта на животното. От 5-10-ия ден можете да изследвате пунктата на лимфния възел.

Алергични тестове. Тези тестове се провеждат с помощта на туберкулин– препарат от M. tuberculosis. За първи път това вещество е получено от Р. Кох през 1890 г. от варени бактерии („стар туберкулин“). Сега се използва туберкулин, пречистен от примеси и стандартизиран в единици туберкулин (PPD - пречистено протеиново производно). Това е филтрат от бактерии, убити чрез нагряване, промити с алкохол или етер, изсушени чрез замразяване. От имунологична гледна точка хаптенът реагира с имуноглобулини, фиксирани върху Т-лимфоцитите.

Тестът Манту се извършва чрез интрадермално инжектиране на туберкулин. Отчитане на резултатите след 48-72 часа. Положителен резултат е локална възпалителна реакция под формата на оток, инфилтрация (уплътнение) и зачервяване - папула. Положителният резултат показва сенсибилизация (или наличие на микобактерии в тялото). Сенсибилизацията може да бъде причинена от инфекция (реакцията е положителна 6-15 седмици след заразяването), заболяване, имунизация (при ваксинираните с жива ваксина).

Поставя се туберкулинов тест за избор на реваксинация, както и за оценка на хода на туберкулозния процес. Обратът на Манту също е важен: положителен(положителен след отрицателен тест) - инфекция, отрицателен(след положителен тест е отрицателен) - смъртта на микобактериите.

Профилактика и лечение.За специфична профилактика се използва жива ваксина. BCG– BCG (Bacille de Calmette et de Guerin). Щамът BCG е получен от A. Calmette и M. Gerin чрез продължително преминаване на туберкулозни бацили (M. bovis) върху картофено-глицеринова среда с добавяне на жлъчка. Те направиха 230 трансфера за 13 години и получиха култура с намалена вирулентност. В нашата страна в момента всички новородени се ваксинират срещу туберкулоза на 5-7-ия ден от живота чрез интрадермален метод (външната повърхност на горната трета на рамото), след 4-6 седмици се образува инфилтрат - пустула (малък белег ). Микобактериите се вкореняват и се намират в тялото от 3 до 11 месеца. Ваксинацията предпазва от заразяване с диви улични щамове през най-уязвимия период. Реваксинацията се извършва на лица с отрицателен туберкулинов тест с интервал от 5-7 години до 30-годишна възраст (в 1, 5-6, 10 клас на училището). По този начин се създава инфекциозен имунитет, при който възниква реакцията на ХЗТ.

За лечение на туберкулоза се използват антибиотици, химиотерапевтични лекарства, към които патогените са чувствителни. Това са лекарства от първа линия: тубазид, фтивазид, изониазид, дихидрострептомицин, PAS и втора линия: етионамид, циклосерин, канамицин, рифампицин, виомицин. Всички противотуберкулозни лекарства действат бактериостатично, бързо се развива резистентност към всяко лекарство (кръстосано), поради което за лечение се провежда комбинирана терапия едновременно с няколко лекарства с различни механизми на действие, с чести промени в комплекса от лекарства.

Комплексът от терапевтични мерки използва десенсибилизираща терапия, както и стимулиране на естествените защитни механизми на организма.

Mycobacterium проказа.

Причинителят на проказата (лепра) - Mycobacterium leprae е описан от G. Hansen през 1874 г. Проказата е хронично инфекциозно заболяване, което се среща само при хората. Заболяването се характеризира с генерализиране на процеса, увреждане на кожата, лигавиците, периферните нерви и вътрешните органи.

Морфология, физиология.Микобактериите на проказата са прави или леко извити пръчици с дължина от 1 до 7 микрона, с диаметър 0,2-0,5 микрона. В засегнатите тъкани микроорганизмите се намират вътре в клетките, образувайки плътни сферични клъстери - прокажени топки, в които бактериите са плътно прилепнали една към друга със странични повърхности („цигарени пръчици“). Киселинноустойчив, оцветен в червено по метода на Ziehl-Neelsen.

Mycobacterium lepra не се култивира върху изкуствени хранителни среди. През 1960 г. е създаден експериментален модел с инфекция на бели мишки в подложките на лапите, а през 1971 г. - броненосци, при които на мястото на инжектиране на микобактериална проказа се образуват типични грануломи (лепроми), а при интравенозна инфекция се развива генерализиран процес с възпроизводството на микобактерии в засегнатите тъкани.

Антигени.От екстракта от лепрома са изолирани два антигена: термостабилен полизахарид (група за микобактерии) и термолабилен протеин, силно специфичен за бацили на проказа.

Екология и разпространение.Естественият резервоар и източник на причинителя на проказа е болен човек. Заразяването става при продължителен и близък контакт с болния.

Свойствата на патогена, връзката му с ефектите на различни фактори на околната среда не са достатъчно проучени.

Патогенност на патогена и патогенеза на проказата.Инкубационният период на проказата е средно 3-5 години, но е възможно удължаване до 20-30 години. Развитието на болестта става бавно, в продължение на много години. Има няколко клинични форми, от които най-тежката и епидемично опасна е лепроматозната: по лицето, предмишниците, долните крака се образуват множество инфилтрати-лепроми, които съдържат огромен брой патогени. В бъдеще лепромите се разпадат, образуват се бавно заздравяващи язви. Засягат се кожата, лигавиците, лимфните възли, нервните стволове и вътрешните органи. Друга форма - туберкулоид - е клинично по-лесна и по-малко опасна за другите. При тази форма кожата е засегната, а нервните стволове и вътрешните органи са по-рядко срещани. Обривите по кожата под формата на малки папули са придружени от анестезия. В лезиите има малко патогени.

Имунитет.По време на развитието на заболяването настъпват резки промени в имунокомпетентните клетки, главно в Т-системата - броят и активността на Т-лимфоцитите намаляват и в резултат на това се губи способността им да реагират на антигени на Mycobacterium lepra. Реакцията на Мицуда към въвеждането на лепромин в кожата при пациенти с лепроматозна форма, която възниква на фона на дълбоко потискане на клетъчния имунитет, е отрицателна. При здрави индивиди и при пациенти с туберкулоидна форма на проказа е положителен. Така тази мярка отразява тежестта на увреждането на Т-лимфоцитите и се използва като прогностичен фактор, който характеризира ефекта от лечението. Хуморалният имунитет не е нарушен. В кръвта на пациентите се откриват антитела срещу микобактериите на проказата във високи титри, но те изглежда не играят защитна роля.

Лабораторна диагностика.Бактериоскопичният метод, изследващ изстъргвания от засегнатите участъци от кожата, лигавиците, разкрива характерно локализираната Mycobacterium проказа с типична форма. Натривките се оцветяват по Ziehl-Neelsen. В момента няма други методи за лабораторна диагностика.

Профилактика и лечение.Няма специфична профилактика на проказата. Противопроказните институции провеждат комплекс от превантивни мерки. Болните от проказа се лекуват в колонии за прокажени до клинично възстановяване, а след това амбулаторно.

У нас рядко се регистрира проказа. Отделни случаи се срещат само в определени области. Според СЗО в света има повече от 10 милиона пациенти с проказа.

Лечението на проказата се извършва със сулфонови препарати (диацетилсулфон, селюсулфон и др.). Те също така използват десенсибилизиращи средства, лекарства за лечение на туберкулоза, както и биостимуланти. Разработват се методи за имунотерапия.

Тема 37. Възбудители на туберкулозата

SBEE HPE "Уралски държавен медицински университет" на Министерството на здравеопазването на Руската федерация Катедра по микробиология, вирусология и имунология

Методически указания за практически упражнения за студенти

BEP специалност 060301.65 Фармация Дисциплина C2.B.11 Микробиология

1. Тема: Причинителите на туберкулозата

2. Цели на урока: Да се ​​изучават със студентите свойствата на туберкулозните патогени, факторите на патогенезата, патогенезата, методите за диагностика, профилактика и лечение на туберкулоза.

3. Задачи на урока:

3.1. Изследване на свойствата на причинителите на туберкулоза.

3.2. Изследване на патогенезата на туберкулозата.

3.3. Проучване на методите за диагностика, профилактика и лечение на туберкулоза.

3.4. Извършване на самостоятелна работа.

лекарства според Циля-

проблеми и процеси

и клинични науки в

желание за участие

в научната

обхват на общността

4. Продължителност на учебния час в учебни часове: 3 часа.

5. Контролни въпроси по темата:

5.1. Морфологични, тинкториални, културни и биохимични свойства на туберкулозните патогени.

5.2. Фактори на патогенност на причинителите на туберкулоза.

5.3. Методи за диагностика, профилактика и лечение на туберкулоза.

6. Задачи и насоки за тяхното изпълнение.

В клас ученикът трябва:

6.1. Отговорете на въпросите на учителя.

6.2. Участвайте в обсъждането на изучаваните въпроси.

6.3. Извършване на самостоятелна работа.

Предистория Туберкулозата е хронично инфекциозно заболяване, придружено от

специфични увреждания на различни органи и системи (дихателни органи, лимфни възли, черва, кости, стави, очи, кожа, бъбреци, пикочни пътища, полови органи, централна нервна система). При туберкулоза в органите се образуват специфични грануломи (granulum - зърно) под формата на възли или туберкули (tuberculum - туберкулоза) с последващата им сирна дегенерация (разпад) и калцификация.

История справка. От древни времена това заболяване е известно под наименованията консумация, туберкулоза, скрофулоза поради характерните клинични признаци. Първо отделя "консумацията" от други белодробни заболявания Laennec през 1819 г., той въвежда термина "туберкулоза" (оттук и синонимът - туберкулоза). През 1882 г. Р. Кох открива причинителя на туберкулозата и получава чиста култура върху серумна среда (бацил на Кох или бацил). През 1890 г. Р. Кох получава туберкулин („водно-глицеринов екстракт от туберкулозни култури“). През 1911 г. Р. Кох е удостоен с Нобелова награда за откриването на причинителя на туберкулозата.

Таксономия. Отдел Firmicutes, семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium.

Туберкулозата при хората най-често се причинява от три вида микобактерии: M. tuberculosis (бацилът на Кох, човешкият вид - причинява заболяването в 92% от случаите), M. bovis (говежди вид - причинява заболяването в 5% от случаите) , M. africanum (междинен вид - причинява заболяване в 3% от случаите, в Южна Африка - много по-често). Рядко туберкулозата при хората се причинява от M. microti (миши тип) и M. avium (птичи тип, който причинява инфекция при имунокомпрометирани индивиди).

Морфологични и тинкториални свойства. Причинителите на туберкулозата се характеризират с изразен полиморфизъм (коковидни, нишковидни, разклонени, колбовидни форми). По принцип те имат формата на дълги тънки (M. tuberculosis, M. africanum) или къси и дебели (M. bovis) пръчици с гранулирана цитоплазма, съдържаща от 2 до 12 зърна с различни размери (метафосфатни зърна - Fly grains). Понякога те образуват нишковидни структури, наподобяващи мицела на гъбите, което е в основата на името им (mykes - гъба и bacterium - бактерия). Неподвижен. Спор не се образува. Имат микрокапсула.

Грам-положителен. Микобактериите са бактерии, устойчиви на киселини, алкохол и основи. За тяхното оцветяване се използва методът Tsilya.

Nielsen (термокиселинно ецване с карболов фуксин). С този цвят микобактериите изглеждат като яркочервени пръчици, разположени поотделно или в малки групи от 2-3 клетки.

културни ценности. облигатни аероби. Те растат бавно поради наличието на липиди в клетъчната стена, които забавят метаболизма с околната среда. Оптималната температура за растеж е 37-38ºС. Оптималната стойност на pH е 6,8-7,2. Микобактериите са взискателни към хранителни среди, зависими от глицерин. За потискане на токсичния ефект на мастните киселини, образувани в процеса на метаболизма, към средата се добавят активен въглен, животински кръвен серум и албумин, а за потискане на растежа се добавят багрила (малахитово зелено) и антибиотици, които не действат върху микобактериите. свързана микрофлора.

Елективна културална среда за микобактерии:

- яйчни среди на Levenshtein-Jensen, Finn-2;

- глицеринова среда на Middlebrook;

- картофена среда с жлъчка;

— полусинтетична среда Школникова;

- Синтетични медии Soton, Dubos.

Върху твърда среда, на 15-20-ия ден от инкубацията, микобактериите образуват груби гъсти кремави колонии с брадавичен вид (напомнящи

В течна среда, след 5-7 дни, на повърхността се образува дебел, сух, набръчкан филм с кремав цвят. В този случай бульонът остава прозрачен.

За експресна диагностика се използва методът на микрокултивиране върху очила в течна среда (метод на микрокултурата на Прайс), при който след 48-72 часа се отбелязва растежът на микобактериите под формата на преплетени момичешки „плитки“ или „плитки“. поради корд фактора (англ. cord - турникет, въже).

Химичен състав. Основните компоненти на микобактериите са протеини (туберкулопротеини), въглехидрати и липиди.

Туберкулопротеините съставляват 56% от сухата маса на веществото на микробната клетка. Те са основните носители на антигенните свойства на микобактериите, силно са токсични и предизвикват развитие на реакция на свръхчувствителност тип 4.

Делът на полизахаридите представлява 15% от сухата маса на веществото на микобактериите. Това са специфични за рода хаптени.

Делът на липидите (фтионова киселина, маслена, палмитинова, туберкулостеаринова и други мастни киселини, корд фактор и восък D, който включва миколова киселина) възлиза на 10-40% от сухата маса на веществото на микобактериите. Високото съдържание на липиди определя киселинната, алкохолната и алкалната резистентност на патогена, вирулентността, трудното оцветяване на клетките с конвенционални методи и устойчивостта в околната среда. Липидите скринират бактериалната клетка, инхибират фагоцитозата, блокират активността на клетъчните ензими, причиняват развитието на грануломи и казеозна некроза.

съпротива. В засъхналата храчка на пациента клетките остават жизнеспособни и вирулентни в продължение на 5-6 месеца. На обектите на пациента остават повече от 3 месеца. В почвата остават до 6 месеца, във водата - до 15 месеца. Слънчевата светлина причинява смъртта на микобактериите след 1,5 часа, UV светлината - след 2-3 минути. При пастьоризиране умират след 30 минути. Хлорсъдържащи

лекарства причиняват смъртта на туберкулозни патогени в рамките на 3-5 часа, 5% разтвор на фенол - след 6 часа.

Фактори на патогенност на микобактериите:

- корд фактор - гликолипид на клетъчната стена, причинява увреждане на клетъчните мембрани и инхибира образуването на фаголизозоми, причинявайки развитие на непълна фагоцитоза;

Туберкулозните патогени не образуват екзотоксини. Продуктите от разпада на клетките са силно токсични.

Основният фактор за патогенността на микобактериите е корд факторът (името идва от английското cord - турникет, въже). Факторът на кордата причинява „претъпкан тип растеж“ в течна среда под формата на „извити нишки“ (или плитки), в които микобактериалните клетки са подредени в успоредни вериги.

Епидемиология. Туберкулозата е повсеместна. Основният източник на инфекция е болен човек с респираторна туберкулоза, който отделя микроби в околната среда с храчки. Източници на инфекцията могат да бъдат също хора с извънбелодробни форми на туберкулоза и болни животни (говеда, камили, свине, кози и овце). Основният механизъм на заразяване е аерогенен. Начини на предаване на патогена - въздушно-капков и въздушно-прахов. Входната врата в този случай е лигавицата на устната кухина, бронхите и белите дробове. По-рядко инфекцията с туберкулоза може да възникне по хранителен (хранителен) път при използване на нетермично обработено месо и млечни продукти. Възможен контактно-битов начин на предаване на инфекция от пациенти с туберкулоза при използване на заразени дрехи, играчки, книги, съдове и други предмети. Известни са случаи на заразяване на хора при грижи за болни животни.

Патогенеза. След като проникнат в човешкото тяло, микобактериите се фагоцитират.

Във фагоцитите се образуват фагозоми, вътре в които микобактериите остават живи и се размножават. Във фагоцитите микобактериите се транспортират до регионалните лимфни възли, оставайки в „спящо“ състояние за дълго време (непълна фагоцитоза). В този случай възниква възпаление на лимфните пътища (лимфангит) и лимфните възли (лимфаденит). На мястото на въвеждане на патогена се образува фокус на възпаление. Това възпаление става специфично в рамките на няколко седмици (развива се реакция на свръхчувствителност от забавен тип), което води до образуване на гранулом. Впоследствие макрофагите се трансформират в епителни клетки. При сливането на епителни клетки се образуват гигантски многоядрени клетки. Около фокуса на възпалението се образува съединителнотъканна капсула, некротичните тъкани се калцират. В резултат на това се образува първичен туберкулозен комплекс, вътре в който има казеозна некротична тъкан и остават живи микобактерии.

Клиника. Инкубационният период продължава от 3-8 седмици до 1 година или повече.

Клиничните прояви на туберкулозата са разнообразни, тъй като микобактериите могат да засегнат всички органи (черва, пикочно-полови органи, кожа, стави). Симптомите на туберкулозата са умора, слабост, загуба на тегло

тяло, продължителна субфебрилна температура, обилно нощно изпотяване, кашлица с храчки с кръв, задух. Няма симптоми, характерни само за туберкулозата. Когато кожата е засегната, се отбелязват язвени огнища. При туберкулоза на костите и ставите се появяват лезии, характерни за артрит от всякаква етиология: изтъняване на хрущяла, поява на шипове, стесняване на ставните кухини.

Имунитет. Противотуберкулозният имунитет се формира в отговор на проникването на микобактерии в тялото по време на инфекция или ваксинация и е нестерилен, поради дългосрочното персистиране на бактериите в тялото. Проявява се 4-8 седмици след проникването на микробите в тялото. Формират се както клетъчен, така и хуморален имунитет.

Клетъчният имунитет се проявява чрез състояние на свръхчувствителност (сенсибилизация). Благодарение на това тялото придобива способността бързо да свързва нова доза от патогена и да го отстранява от тялото: Т-лимфоцитите разпознават клетките, заразени с микобактерии, атакуват ги и ги унищожават.

Хуморалният имунитет се проявява чрез синтеза на антитела към антигени на микобактерии. Образуват се циркулиращи имунни комплекси (CIC), които помагат за отстраняването на антигените от тялото.

Имунитетът при туберкулоза се поддържа, докато има патоген в тялото. Такъв имунитет се нарича нестерилен или инфекциозен. След освобождаването на тялото от микобактериите имунитетът бързо изчезва.

Микробиологична диагностика. Изследваният материал е храчка,

бронхиален аспират, фистулен секрет, CSF, урина, изпражнения. Най-често се изследва храчка. За диагностика на туберкулозата се използват основни и допълнителни методи за изследване.

- бактериоскопски метод (светлинна и луминисцентна микроскопия);

- кожни алергични тестове;

— молекулярно-биологичен метод (PCR).

Бактериоскопското изследване е повторна директна микроскопия на петна от тестовия материал, оцветени по Ziel-Neelsen. В препаратите могат да се открият единични микроорганизми, ако съдържат най-малко 10 000-100 000 бактериални клетки в 1 ml храчка (лимит на метода). Този метод се прилага:

- при преглед на хора със симптоми, подозрителни за туберкулоза (кашлица с храчки за повече от 3 седмици, болка в гърдите, хемоптиза, загуба на тегло);

- при лица, които са били в контакт с болни от туберкулоза;

- при лица с рентгенови промени в белите дробове, съмнителни за туберкулоза.

При получаване на отрицателни резултати те прибягват до методи за обогатяване на материала: центрофугиране (утаяване) и флотация. Най-често използваният метод е флотацията.

Метод на центрофугиране - изследваният материал се обработва с алкали и се центрофугира. От утайката се приготвя препаратът за микроскопия.

Метод на флотация - изпитваният материал се обработва със смес от алкали и ксилен (бензин, бензен, толуен). Пробата се разклаща енергично в продължение на 10-15 минути, добавя се дестилирана вода и се държи 1-2 часа при стайна температура. Въглехидратните капчици адсорбират микобактериите и плуват, образувайки пяна на повърхността. От получената пяна се приготвя препаратът за микроскопия.

Бактериологичното изследване се извършва чрез засяване на тестовия материал (след третиране с 6-12% разтвор на сярна киселина) върху 2-3 хранителни среди с различен състав едновременно. Като ускорени методи за бактериологична диагностика, за да се намали времето за изолиране и идентифициране на патогена до 3-4 дни, се използва методът на микрокултурата (метод на Price), както и напълно автоматизирани търговски системи за култивиране на бульон VASTEC MGIT 960 и MB/VacT .

Бактериологичният метод ви позволява да получите чиста култура, за да определите нейната вирулентност и чувствителност към лекарства. Този метод се използва широко за проследяване на ефективността на терапията.

Биологичната проба е най-чувствителната, тъй като позволява откриването на от 1 до 5 микробни клетки в изследвания материал. Методът се използва при изследване на биопсичен материал, както и при получаване на отрицателни резултати при използване на първите два метода на изследване. За да направите това, морските свинчета се инжектират подкожно или интраперитонеално с тестовия материал (1 ml). След 1-2 месеца животните развиват генерализирана туберкулоза с летален изход.

Серологичен метод. Предложен RSK, RNGA, ензимен имуноанализ, имуноблотинг, определяне на CEC.

Туберкулиновата диагностика се основава на определяне на свръхчувствителността на организма към туберкулин (в резултат на инфекция с туберкулозни патогени или специфична ваксинация) с помощта на кожни алергични тестове. Туберкулинът се използва за извършване на кожна алергична проба. Туберкулинът е общото наименование на лекарства, получени от човешки или говежди микобактерии:

- Старият туберкулин на Кох - АТК (Alt Tuberculin Kosh), получен за първи път през 1880 г. от Р. Кох. Това е филтрат от автоклавна 5-6-седмична бульонна култура на Mycobacterium tuberculosis;

- сух пречистен туберкулин - PPD (Purified Protein Derivative),

получени от култури M. tuberculosis и M. bovis;

- пречистен туберкулин, приготвен от M.A. Линникова (PPD-L) от култури на M. tuberculosis и M. bovis.

За диагностициране на туберкулоза първоначално е използван кожният тест на Pirque (скарификация). В момента, с цел своевременно идентифициране

първична инфекция на деца и юноши се използва интрадермален тест Манту. При настройване на теста на Манту, туберкулинът (PPD) се инжектира строго интрадермално върху вътрешната повърхност на средната третина на предмишницата, докато се образува „копче“. Резултатите от теста се вземат предвид след 48-72 часа от наличието на папула. Тестът Манту се оценява, както следва:

- отрицателен - наличие на реакция от инжекция с диаметър до 2 mm;

- съмнителна - папула с диаметър 2-4 mm или хиперемия;

- положителен - папула с диаметър 5-17 mm при деца и юноши и 5-21 mm

- хиперергична - папула с диаметър над 17 mm при деца и юноши и над 21 mm при възрастни.

Туберкулиновата реакция става положителна 4-6 седмици след инфекцията или ваксинацията. След ваксинацията положителните реакции към туберкулин продължават 3-7 години. Положителният резултат не може да се счита за признак на активен процес. Положителният тест на Манту показва, че лицето преди това е било заразено с микобактерии. Хората с положителни туберкулинови проби са изложени на риск от заболяване в резултат на активиране на първичния фокус. Ако при възрастни положителната реакция показва инфекция, тогава при деца, които преди това не са реагирали на туберкулин, появата на новорегистрирана положителна реакция (огъване на туберкулиновия тест) показва скорошна инфекция и служи като индикация за клиничен преглед и лечение.

При отрицателна реакция няма риск от активиране на първичния фокус, но съществува риск от първична инфекция. Отрицателен тест се наблюдава при здрави неинфектирани индивиди, както и при пациенти с междинни форми на туберкулоза.

За бърза диагностика на туберкулоза се използва RIF с използване на видово-специфични моноклонални антитела, лазерна флуоресценция, микробиочипове и PCR, което позволява да се намали изследването до 2 дни.

Лечение. Антибиотичната терапия е основното лечение на туберкулозата. Според степента на ефективност противотуберкулозните лекарства се разделят на 3 групи:

- група А - най-ефективните лекарства: изониазид (антиметаболит, аналог на изоникотинова киселина, инхибира синтеза на ензими, участващи в синтеза на миколови киселини, които са част от клетъчната стена на микобактериите), рифампицин и техните производни. Получени са препарати, които превъзхождат рифампицин по терапевтични свойства (рифапентин и рифабутин), както и комбинирани препарати (рифатер, рифанг и др.);

- група В - лекарства със средна ефективност: етамбутол (синтетично лекарство, което инхибира ензимите, участващи в синтеза на клетъчната стена на микобактериите, е активно само срещу размножаващи се бактерии), канамицин, стрептомицин, циклосерин, етионамид (протионамид), пиразинамид, флоримицин , флуорохинолонови производни;

- група С - малки противотуберкулозни лекарства (ПАСК и тибон или тиоценозон). Тази група лекарства не се използва в икономически развитите страни и в Русия.

Много бързо се появяват щамове на микобактерии, устойчиви на противотуберкулозни лекарства. Затова се използват комбинации от лекарства с различен механизъм на действие, както и честа подмяна на лекарства. Това забавя появата на резистентни форми. В съвременните схеми на лечение се използват 3-5 лекарства едновременно (три-петкомпонентни схеми на лечение).

специфична профилактика. Провежда се специфична профилактика чрез поставяне на жива BCG ваксина (BCG - Bacille Calmette-Guerin). Щамът BCG е селекциониран през 1919 г. от A. Calmette и C. Guerin чрез продължително пасиране на M. bovis върху картофено-глицеринова среда с добавяне на жлъчка.

Ваксинацията се извършва при новородени на 3-7-ия ден от живота интрадермално. На мястото на инжектиране се образува инфилтрат с малък възел в центъра. Обратното развитие на инфилтрата настъпва в рамките на 3-5 месеца. Реваксинация - на 7 и 14 години за хора с отрицателна реакция на Манту, затова преди провеждането й се поставя проба Манту. При новородени с намалена резистентност и в райони, свободни от туберкулоза, се използва по-малко реактогенна BCG-M ваксина, съдържаща 2 пъти по-малко микроби.

След обсъждане на теоретични въпроси, учителят обяснява процедурата за провеждане на самостоятелна работа.

1. Учениците подготвят препарати от култури от непатогенни микобактерии, оцветяват ги по Ziehl-Neelsen, микроскоп, рисуват микроскопска картина в работна тетрадка.

2. В работната тетрадка учениците рисуват схема на лабораторната диагностика на туберкулозата.

7. Оценка на знанията, уменията по темата на урока:

Отговорите на въпроси и активността в урока се оценяват по 5-бална система.

8. Литература за подготовка на темата:

1. Galynkin V., Zaikina N., Kocherovets V. Основи на фармацевтичната микробиология. 2008 г.

2. Медицинска микробиология, вирусология и имунология: учебник за студенти по медицина. Изд. А.А. Воробьов. Учебници и изследвания. надбавки за висше образование. Издател: Медицинска информационна агенция, 2012. - 702 с.

3. Микробиология: учебник. за студенти от висши училища. проф. образование, студенти по специалност 060301.65 “Фармация” / ред. В.В. Зверева, М.Н. Бойченко. - М.: GEOTAR-Media, 2012. - 608 с.: ил.

4. Одегова Т.Ф., Олешко Г.И., Новикова В.В. микробиология. Учебник за фармацевтичните университети и факултети. - Перм, 2009. - 378 с.

1. Коротяев А.И. Медицинска микробиология, имунология и вирусология: Учебник за студенти по медицина. университети / A.I. Коротяев, С.А. Бабичев. - 5-то издание, Рев. и

добавете. - Санкт Петербург: SpecLit, 2012. - 759 с.: ил.

2. Медицинска микробиология: учебник. 4-то изд. Поздеев О.К. / Ед. В И. Покровски. - 2010. - 768 с.

3. Ръководство по медицинска микробиология. Обща и санитарна микробиология. Книга 1 / Кол. автори // Под редакцията на Labinskaya A.S., Volina E.G. - М.: Издателство БИНОМ, 2008. - 1080 с.: ил.

Методическите указания са преработени и допълнени от професор Литусов Н.В.

Обсъдено на заседание на Катедрата по микробиология, вирусология и имунология.

No21 Причинителите на туберкулозата. Таксономия и характеристики. Условно патогенни микобактерии. Микробиологична диагностика на туберкулоза.
Туберкулоза- хронично заболяване на човека, придружено от увреждане на дихателните органи, лимфните възли, червата, костите и ставите, очите, кожата, бъбреците и пикочните пътища, гениталните органи, централната нервна система.
Заболяването се причинява от 3 вида микобактерии: Mycobacterium tuberculosis - човешки вид, Mycobacterium bovis - говежди вид, Mycobacterium fricanum - междинен вид.
Таксономия. Отдел Firmicutes, род Mycobacterium. Генерична характеристика - устойчивост на киселини, алкохол и основи.
Морфология, тинкториални и културни свойства. Изразен полиморфизъм. Те имат формата на дълги, тънки (M.tuberculosis) или къси, дебели (M.bovis), прави или леко извити пръчки с хомогенна или гранулирана цитоплазма; Грам-положителни, неподвижни, не образуват спори, имат микрокапсула. За идентифицирането им се използва оцветяването по Ziehl-Neelsen. Микобактериите могат да образуват различни морфовари (L-форми на бактерии), които се задържат в тялото дълго време и предизвикват противотуберкулозен имунитет.
Причинителите на туберкулозата се характеризират с бавен растеж, взискателни към хранителни среди. M. tuberculosis са аероби, глицерин-зависими. На течни хранителни среди дават растеж под формата на сух кремав филм. По време на вътреклетъчното развитие, както и по време на растеж върху течна среда, се открива характерен корд фактор, поради който микобактериите растат под формата на "влакна". На плътна среда растежът е под формата на кремообразно, сухо, люспесто покритие с неравни ръбове (R-образна форма). Докато растат, колониите придобиват брадавичен вид. Под въздействието на антибактериални агенти патогените променят своите културни свойства, образувайки гладки колонии (S-форми). M. bovis - растат върху среда по-бавно от M. tuberculosis, зависими от пируват; върху плътни хранителни среди образуват малки сферични, сиво-бели колонии (S-форми).
ензимна активност.Висока каталазна и пероксидазна активност. Каталазата е термолабилна. M.tuberculosis синтезира ниацин (никотинова киселина) в големи количества, който се натрупва в хранителната среда и се определя в теста на Конно.
Химичен състав:Основните химични компоненти на микобактериите са протеини, въглехидрати и липиди. Липиди (фосфатиди, корд фактор, туберкулостеаринова киселина) - причиняват резистентност към киселини, алкохоли и основи, предотвратяват фагоцитозата, нарушават пропускливостта на лизозомите, причиняват развитието на специфични грануломи, унищожават клетъчните митохондрии. Микобактериите предизвикват развитие на реакция на свръхчувствителност тип IV (туберкулин).
Фактори на патогенност: oОсновните патогенни свойства се дължат на директно или имунологично медиирано действие на липиди и липидосъдържащи структури.
Антигенна структура:В хода на заболяването се образуват антипротеинови, антифосфатидни и антиполизахаридни антитела към антигени, което показва активността на процеса.
съпротива. Наличието на липиди - устойчиви на неблагоприятни фактори. Сушенето има малък ефект. Умират при варене.
Епидемиология. Основният източник на инфекция е човек с респираторна туберкулоза, който отделя микроби в околната среда с храчки. Основните пътища на предаване на инфекцията са въздушно-капков и въздушно-капков.
Патогенеза и клиника.Различни имунодефицити допринасят за появата на заболяването. Инкубационният период е от 3 до 8 седмици. до 1 година или повече. В развитието на заболяването се разграничават първична, дисеминирана и вторична туберкулоза, която е резултат от ендогенна реактивация на стари огнища. В зоната на проникване на микобактериите възниква първичен туберкулозен комплекс, състоящ се от възпалително огнище, засегнати регионални лимфни възли и променени лимфни съдове между тях. Разпространението на микроби може да стане бронхо-, лимфо- и хематогенно. Основата на специфичното възпаление при туберкулоза е реакция на свръхчувствителност тип IV, която предотвратява разпространението на микробите в тялото.
Има 3 клинични форми: първична туберкулозна интоксикация при деца и юноши, туберкулоза на дихателните пътища, туберкулоза на други органи и системи. Основните симптоми на белодробна туберкулоза са субфебрилна телесна температура, кашлица с храчки, хемоптиза, задух.
Имунитет. Противотуберкулозният имунитет е нестерилен инфекциозен, поради наличието в тялото на L-форми на микобактерии.
Микробиологична диагностика. Диагнозата се извършва с помощта на бактериоскопия, бактериологично изследване и производство на биологична проба. Всички методи са насочени към откриване на микобактерии в патологичен материал: храчка, бронхиални промивки, плеврална и церебрална течност, парчета тъкан от органи.
Задължителните методи на изследване включват бактериоскопско, бактериологично изследване, биологичен тест, туберкулинова диагностика, базирана на определяне на свръхчувствителността на организма към туберкулин. По-често, за откриване на инфекция и алергични реакции, те поставят интрадермален тест на Манту с пречистен туберкулин в стандартно разреждане. За бърза диагностика на туберкулоза се използват RIF (имунофлуоресцентна реакция) и PCR (полимеразна верижна реакция). . За масово проучване на населението, ранно откриване на активни форми на туберкулоза, можете да използвате ELISA (ензимен имуноанализ), насочен към откриване на специфични антитела.
Лечение. Според степента на ефективност противотуберкулозните лекарства се разделят на групи: група А - изониазид, рифампицин; група В - пиразинамид, стрептомицин, флоримицин; група С - ПАСК, тиоацетозон. При наличие на съпътстваща микрофлора и мултирезистентност на микобактериите се използват флуорохинолони и алдозон.
Предотвратяване. Специфичната профилактика се извършва чрез въвеждане на жива ваксина - BCG (BCG), интрадермално на 2-5-ия ден след раждането на детето. Извършват се последващи реваксинации. Предварително се поставя тест на Манту, за да се идентифицират туберкулиноотрицателни лица, които подлежат на реваксинация.
Опортюнистични микобактерии: семейство Mycobacteriaceae, род Mycobacterium. Биологично подобни. свойства, но са устойчиви на противотуберкулозни лекарства.
Група 1: бавнорастящи фотохромогенни M.kansassi, M.marinum - кожни лезии, лимфаденит, инфекции на пикочните пътища.
Група 2: бавнорастящи говеда-хромогенни: M.scrofulaceum, M.gordonae.
Група 3: бавнорастящи нехромогенни: M.avium, M.gastri.
Група 4: бързорастящи животни, фотохромогенни: M.fortuitum, M.chelonei.

Морфология на Mycobacterium tuberculosis (червени пръчици) в храчка. Оцветяване по Ziehl-Neelsen. Грам-положителни тънки прави или леко извити пръчки; - Клетъчната стена съдържа голямо количество восъци и липиди (миколова киселина), което причинява хидрофобност, устойчивост на киселини, основи, алкохоли; - Оцветени по Ziel-Nielsen; - Неподвижен, не образува спори и капсули; - Възможен е преход към филтрируеми и L-форми

Културни свойства Аероби; Растат върху хранителна среда, съдържаща яйца, глицерин, картофи, аспарагин, витамини, соли; Най-често използваната яйчна среда Lowenstein-Jensen и синтетична среда Soton; растат бавно (растежът се открива след 2-3 седмици и по-късно); Колониите са сухи, набръчкани, сивкави; Те имат биохимична активност, която позволява диференцирането на видове.Основният тест е ниацин тест (натрупване на никотинова киселина в течна среда, среда на Lowenstein-Jensen и растеж на микобактерии.

Фактори на патогенност Фактор на адхезия - корда - фактор = естер на трегалоза и два остатъка на миколова киселина; Антифагоцитни фактори - восъци (особено восък D), сулфати и някои други съединения, които предотвратяват сливането на фаго- и лизозоми; Сулфолипидите инхибират активността на лизозомните ензими; Фозатидните и восъчните фракции на липидите предизвикват сенсибилизация на тялото; Ацетон-разтворимите липиди подобряват имуносупресивните свойства на микобактериите и модифицират мембраните на клетките на гостоприемника; Липидите осигуряват устойчивост на комплемента, свободните радикали на фагоцитите Основният фактор - туберкулин - има токсични и алергични свойства

Взаимодействието на Mycobacterium tuberculosis с човешкото тяло започва, когато патогенът навлезе в белите дробове. Събитията, които се случват след това (макрофагите инхибират или не възпроизвеждането на микобактерии), се определят от съотношението между бактерицидната активност на макрофагите и вирулентността на микобактериите. След възпроизвеждане вътре в макрофага, микобактериите го унищожават. Моноцитите, напускащи кръвния поток под въздействието на хемотаксисни фактори, улавят микобактериите, освободени от унищожените макрофаги. Макрофагите пренасят микобактериите до най-близките лимфни възли, където остават за дълго време поради непълна фагоцитоза, развитие на малки или неспецифични възпаление с макрофагова инфилтрация

Патогенеза (продължение) 2-4 седмици след заразяването започва следващият етап на взаимодействие между микобактериите и макроорганизма. В този случай се наблюдават два процеса - реакция на тъканно увреждане от типа DTH (специфична възпалителна реакция) и реакция на активиране на макрофаги. С развитието на имунитета и натрупването на голям брой активирани макрофаги в първичния фокус се образува туберкулозен гранулом Гранулома Грануломите се състоят от лимфоцити и активирани макрофаги, т.е. епителни и гигантски клетки. калцифицирани в резултат на отлагането на калциеви соли, около фокуса се образува съединителнотъканна капсула - фокусът на Gon HO микобактериите под формата на L-форми остават жизнеспособни в такъв фокус в продължение на много години. намалява, фокусът се активира с развитието на вторична туберкулоза

Имунитет Противотуберкулозният имунитет се формира в отговор на проникването на микобактерии в тялото по време на инфекция или след ваксинация и е нестерилен, инфекциозен по природа, поради дълготрайното персистиране на L-формите.Клетъчният имунитет играе решаваща роля , Резултатът от заболяването се определя от активността на Т-хелперите, които активират фагоцитната активност на макрофагите и активността на Т-убийците

Епидемиология Основният източник на инфекция е пациент с респираторна туберкулоза Начини на предаване - въздушно-капково, по-рядко алиментарно, контакт Mycobacterium tuberculosis е много стабилен във външната среда. В течаща вода те могат да останат жизнеспособни до 1 година, в почва и оборски тор до 6 месеца, върху различни предмети до 3 месеца, в библиотечен прах до 18 месеца, в изсъхнала гной и храчки до 10 месеца. При варене бацилът на Кох умира след 5 минути, в стомашния сок след 6 часа, при пастьоризация след 30 минути, пряката слънчева светлина убива микобактериите за час и половина, а ултравиолетовите лъчи за 2-3 минути. Дезинфектантите, съдържащи хлор, убиват микобактериите в рамките на 5 часа.

Епидемиология (продължение) Туберкулозата е повсеместна Социалните и икономическите фактори допринасят за увеличаването на заболеваемостта (гладуването е основният фактор) От 1990 г. е регистрирано рязко увеличение на заболеваемостта в световен мащаб Вирусът на човешката имунна недостатъчност (HIV) и синдромът на придобитата имунна недостатъчност са причинили значително увеличение на броя на случаите на туберкулоза в някои страни C от друга страна, проблемът е в разпространението на мултирезистентни микобактерии

Лечение В момента, според степента на ефективност, противотуберкулозните лекарства се разделят на 3 групи: Група А - изониазид, рифампицин и техните производни (рифабутин, рифатер) Група Б - стрептомицин, канамицин, етионамид, циклосерин, флуорохинолони и др. C - PAS и тиоацетозон

BCG ваксина (BCG - bacillus Calmette and Guerin) - съдържа живи авирулентни микобактерии, получени от M. bovis чрез продължителни пасажи върху среда, съдържаща жлъчка Постваксиналният имунитет е свързан с образуването на DTH (свръхчувствителност от забавен тип) Специфична профилактика

Лабораторна диагностика Клиничен материал: гной, храчки, кръв, бронхиален ексудат, гръбначно-мозъчна течност, плеврална течност, урина и др. Методи: 1. Бактериоскопски: директно оцветяване на натривка от храчки по метода на Ziehl-Neelsen или натривка след обогатяване (концентрация по методи на флотация или хомогенизиране)

Лабораторна диагностика 4. Бактериологичният (културен) метод се използва за тестване на ефективността на лечението (необходими са 2-8 седмици за растеж на колонии в средата на Levenshtein-Jensen и още известно време за оценка на ефекта от лекарствата, въведени в растежа среден); 5. Серологичен метод (RSK, ELISA, радиоимунен и др.); 6. Биологичен метод (заразяване на морски свинчета и зайци с последващо изолиране на чиста култура на патогена); 7. Туберкулинов тест Манту (виж по-долу); 8. Молекулярно-генетичен метод (PCR)

Кожен алергичен тест на Манту Интрадермалното приложение на високо пречистен туберкулин (PPD = Purified Protein Derivative) предизвиква локална възпалителна реакция под формата на инфилтрат и зачервяване (HRT реакция) при хора, заразени с микобактерии. Неинфектираните хора не реагират на въвеждането на туберкулин. Този тест се използва за идентифициране на заразени, чувствителни хора.